肝星状细胞自分泌Netrin-1信号轴：驱动小鼠肝纤维化与代谢相关脂肪性肝炎的新机制

《Advanced Science》：Autocrine Netrin-1 Signaling in Hepatic Stellate Cells Drives Liver Fibrosis and Diet-Induced Metabolic Dysfunction-Associated Steatohepatitis in Mice

本研究揭示肝星状细胞（HSCs）通过自分泌Netrin-1-UNC5B信号轴激活钙离子（Ca2+）/CaMKII-SMAD2通路，直接促进细胞外基质（ECM）沉积，加剧代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）及肝纤维化；靶向Netrin-1的脂质纳米颗粒（LNP）干预策略为抗纤维化治疗提供新方向。

　　

肝纤维化与Netrin-1的病理关联

肝纤维化是慢性肝病进展的核心病理特征，尤其在代谢相关脂肪性肝炎（MASH）中，其程度直接关联肝硬化与肝细胞癌（HCC）风险。肝星状细胞（HSCs）活化是纤维化发生的关键驱动力，但其自分泌调控机制尚未完全阐明。本研究通过单细胞转录组分析发现，Netrin-1（Ntn1）是HSCs中特异性高表达的分泌因子，在多种肝纤维化模型（如GAN饮食、CCl₄处理、胆管结扎BDL）中均显著上调。

Netrin-1在肝纤维化中的功能验证

功能实验表明，腺相关病毒（AAV）介导的肝特异性Netrin-1过表达加剧饮食诱导MASH和CCl₄模型中的胶原沉积和纤维化标志物（如Col1a1、α-SMA）表达；而HSCs特异性条件性敲除Netrin-1（Ntn1^fl/flLrat-Cre小鼠）则显著缓解纤维化。机制上，Netrin-1通过结合HSCs表面的UNC5B受体，触发快速细胞内Ca²⁺动员，激活CaMKII并促进SMAD2磷酸化，进而驱动纤维化基因表达。

Netrin-1信号通路的特异性与靶向治疗潜力

值得注意的是，Netrin-1的促纤维化作用独立于交感神经调控（经6-羟基多巴胺（6-OHDA）去神经验证）。体外实验中，重组Netrin-1处理增强HSCs的迁移能力及纤维化基因表达，且该效应可被CaMKII抑制剂KN93阻断。进一步利用脂质纳米颗粒（LNP）包裹的siRNA靶向敲低Netrin-1，在体内外均有效抑制HSCs活化并减轻肝纤维化。

结论与转化意义

本研究首次揭示Netrin-1-UNC5B自分泌环路作为HSCs活化的正反馈机制，在肝纤维化中发挥核心作用。靶向该通路的干预策略（如LNP-siRNA）为抗纤维化治疗提供了新思路。