意大利南部犬肠道冠状病毒（CECoV）的血清学与分子流行证据：高风险因素与当前疫情暴发

《Scientific Reports》：Serological and molecular evidence of canine enteric coronavirus in southern Italy

本研究针对犬肠道冠状病毒（CECoV）在意大利坎帕尼亚大区流行情况不明的问题，开展了血清学与分子流行病学调查。结果显示，该地区犬群CECoV血清阳性率高达53.9%，而实时荧光定量PCR检测阳性率为5.8%。研究发现狩猎犬与户外饲养犬为高风险群体，且不同省份流行率差异显著。该研究为CECoV的防控提供了重要流行病学依据，并提示需加强对高毒力毒株的监测。

　　

在人类与伴侣动物关系日益紧密的今天，犬类健康不仅关系到宠物福利，更潜藏着人兽共患病的风险。犬肠道冠状病毒（Canine Enteric Coronavirus, CECoV）作为一种常见的犬类病原体，主要引起胃肠道疾病，在幼犬中可能导致更严重的出血性肠炎甚至死亡。尽管该病毒被认为在全球范围内流行，但其在特定地理区域的真实流行情况和传播动力学却鲜为人知，尤其是在意大利南部的坎帕尼亚大区。更值得警惕的是，冠状病毒家族以其高突变率和重组能力著称，近年来在犬科动物中发现的“泛嗜性”冠状病毒（pantropic CCoV, pCCoV）毒株，以及2022年报道的可能由犬传染给人的新型冠状病毒（CCoV-HuPn-2018和HuC CoV_Z19Haiti），都凸显了持续监测CECoV的必要性。然而，现有的疫苗保护效果存疑，且未被国际指南广泛推荐，使得流行病学调查和风险因素识别成为防控的第一道防线。

为了填补坎帕尼亚大区CECoV流行数据的空白，评估其潜在的公共卫生风险，来自墨西拿大学、那不勒斯腓特烈二世大学和韩国忠南大学的研究团队在《Scientific Reports》上发表了他们的最新研究成果。研究人员开展了一项横断面调查，旨在通过血清学和分子生物学方法，揭示该地区犬群中CECoV的暴露和活动性感染情况，并深入分析与感染相关的风险因素。

本研究采用的关键技术方法主要包括：基于问卷的流行病学调查、酶联免疫吸附试验（ELISA）和TaqMan探针法的实时荧光定量PCR（real-time PCR）。研究共随机采集了坎帕尼亚大区71个地区258只犬的血液样本和154份粪便样本，并收集了包括性别、品种、体型、地理位置、年龄、来源、生活方式和用途（如是否为狩猎犬）在内的详细信息。血清学检测采用商品化ELISA试剂盒检测CECoV特异性抗体，分子检测则采用针对ORF5基因的实时荧光定量PCR方法检测粪便中的病毒RNA。

2. 结果

血清学阳性率与风险因素分析

对258只犬的血清学分析显示，CECoV的总体血清阳性率高达53.9%（139/258）。风险因素的单变量分析表明，地理位置、犬的用途（态度）和生活方式与血清阳性率显著相关。其中，阿韦利诺省和萨莱诺省的血清阳性率最高，分别达到85.7%和71.4%。狩猎犬的血清阳性率（73.8%）显著高于非狩猎犬（49%），户外饲养犬的血清阳性率（60.2%）也显著高于室内饲养犬（28.8%）。而性别、年龄、品种、来源和体型等因素与血清阳性率无显著相关性。多变量逻辑回归分析进一步证实，与阿韦利诺省和萨莱诺省的犬相比，来自贝内文托、卡塞塔和那不勒斯的犬血清阳性的风险显著降低（OR值分别为0.22， 0.09和0.14）。户外生活方式是风险因素（OR = 3.5），而非狩猎态度（即作为宠物犬）是保护因素（OR = 0.45）。

分子检测阳性率与病毒排放特征

在154份粪便样本中，仅有9份（5.8%）检测到CECoV RNA，表明当前正在排放病毒的犬只比例较低。阳性样本的循环阈值（C_t值）范围较宽（16.87 - 39.03），提示病毒载量差异很大。在这9只PCR阳性犬中，仅有2只血清学检测为阴性，5只抗体滴度为1:50，2只滴度高达1:200。从地理分布看，PCR阳性犬只集中出现在阿韦利诺省（n=3）和萨莱诺省（n=4）。此外，绝大多数PCR阳性犬为狩猎犬或流浪犬（8/9），并且有7只主要为户外生活方式。

3. 讨论

本研究揭示了CECoV在意大利坎帕尼亚大区犬群中的广泛传播，超过半数的犬只具有既往感染证据。然而，活动性感染和病毒排放的比例相对较低，这与血清学阳性反映既往暴露、而PCR阳性反映当前排放的不同生物学意义相符。研究结果强调了特定风险因素的重要性：狩猎犬和户外饲养犬由于与其他犬只或野生动物接触机会更多，暴露于病毒的风险显著增加。不同省份之间血清阳性率的巨大差异（从36.7%到85.7%）提示可能存在地域性的疫情暴发点，这一点也得到了PCR阳性样本集中出现在部分省份的支持。

与全球其他研究相比，本调查发现的血清阳性率处于较高水平，而分子流行率与英国、印度等地的部分研究结果相近，但低于中国、荷兰以及意大利其他地区（如撒丁岛、西西里岛）在腹泻犬中的报道。这种差异可能源于检测对象（健康犬与病犬）、采样方法、检测技术敏感度以及当地流行病学状况的不同。值得注意的是，本研究发现PCR阳性犬中包括抗体高滴度和低滴度甚至阴性的个体，这反映了感染的不同阶段或个体免疫应答的差异，也印证了文献中关于感染后病毒排放可持续数月的报道。

4. 结论

本研究通过血清学和分子生物学证据证实，CECoV在意大利南部坎帕尼亚大区的犬群中活跃传播，呈现地方性流行态势。狩猎行为和户外生活方式是重要的风险因素，增加了犬只暴露于病毒的机会。研究结果凸显了对CECoV，特别是其高致病性毒株（如pCCoV）进行持续流行病学监测的必要性。鉴于冠状病毒的变异和跨种传播潜力，加强对犬类冠状病毒的监测不仅对保障犬类健康至关重要，对于预警和防范潜在的人兽共患病风险也具有重要的公共卫生意义。未来的研究应结合病毒分型与测序，以更好地追踪和表征流行毒株的演化动态。