从Macrotyloma uniflorum中提取的染料木素对HDAC7的表观遗传抑制作用：在计算机模拟（silico）、体外（in vitro）和体内（in vivo）实验中探讨其作为白血病治疗手段的潜力

《Medical Oncology》：Epigenetic Inhibition of HDAC7 by Daidzein isolated from Macrotyloma uniflorum: A potential therapeutic approach in leukemia in silico, in-vitro and in-vivo

白血病治疗新策略：大豆苷元通过抑制HDAC7诱导细胞凋亡并改善肝脾病理，同时调节T细胞和单核细胞免疫应答。

　　

摘要

白血病仍然是一种严重的血液系统恶性肿瘤，现有的治疗方法效果有限，且常常伴随着显著的毒性。表观遗传调控紊乱，尤其是异常的组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性，会促进白血病细胞的无控制增殖并抑制细胞凋亡，其中HDAC7被认为是疾病进展的核心驱动因素。来自Macrotyloma uniflorum的天然异黄酮类化合物daidzein是一种有前景的植物来源HDAC抑制剂。本研究通过综合计算、体外和体内实验方法评估了daidzein的抗白血病潜力。分子对接和动力学模拟证实daidzein能够稳定地与HDAC7结合，结合亲和力为?7.6 kcalmol?1，与vorinostat（SAHA；?6.7 kcalmol?1）相当。daidzein显著抑制了HL-60细胞的存活能力（IC?? = 19.6 μM）和HDAC活性（IC?? = 3.4 μM），诱导细胞凋亡和G?/G?期停滞，并通过下调HDAC7活性及增强H3K27的乙酰化作用来调节关键的表观遗传标记。在体内实验中，daidzein显著减少了血液和骨髓中的原始细胞数量，并改善了与白血病相关的肝脏和脾脏病变。通过脾脏和肝脏组织的免疫组化进一步验证了HDAC7的抑制作用。此外，外周血单核细胞的分析显示T细胞和髓系细胞数量增加，同时B细胞和巨噬细胞数量减少，这表明daidzein具有免疫调节潜力。这些抗白血病和免疫调节作用为进一步的临床应用研究提供了支持。

图形摘要

daidzein作为HDAC抑制剂：1) 从药效团建模到分子动力学模拟的全面计算机模拟分析；2) 通过HPLC鉴定和定量以及对Macrotyloma uniflorum中分离出的daidzein进行结构分析（通过¹H,¹²C NMR验证）；3) 体外实验：daidzein诱导细胞凋亡、阻止细胞周期进展、抑制HL-60细胞系中的HDAC7活性以及抑制白血病细胞；4) 体内实验：观察脾脏和肝脏的组织病理变化、分离外周血单核细胞（PBMC），并通过免疫组化证实HDAC7的抑制作用，从而减少白血病中的原始细胞数量。