基于白蛋白的“捕获-释放”模块化T细胞衔接器平台：推动个性化癌症免疫治疗新发展

《Signal Transduction and Targeted Therapy》：A modular “Catch-and-Play” platform for rapid T-cell engager target assembly for personalised cancer treatment

本文推荐一项针对肿瘤异质性挑战的创新研究。为解决BiTE疗法靶点筛选效率低的问题，研究人员开发了基于SpyCatcher/SpyTag技术的模块化"捕获-释放"平台。该平台通过白蛋白-FcRn循环机制实现半衰期延长（6.04倍），在乳腺癌小鼠模型中显著抑制肿瘤增长（p<0.0001），为个性化T细胞衔接器快速组装提供了高效技术路径。

　　

在癌症免疫治疗领域，双特异性T细胞衔接器（BiTE）如同精准的"免疫桥梁"，能同时结合T细胞和肿瘤细胞，引导免疫系统精准攻击癌细胞。然而肿瘤异质性导致患者个体间靶点表达差异巨大，传统BiTE开发周期难以匹配临床需求。面对这一挑战，研究人员在《Signal Transduction and Targeted Therapy》发表的最新研究中，提出了一种革命性的解决方案——基于白蛋白的模块化"捕获-释放"平台，为个性化癌症治疗开启了新的可能。

这项研究的创新之处在于将复杂的抗体工程转化为"即插即用"的模块化系统。通过SpyCatcher/SpyTag分子自组装技术，研究人员仅需15分钟即可完成靶向模块的更换，就像为免疫系统配备可随时更换的"导航头"。这种设计巧妙解决了靶点筛选效率与治疗个性化之间的核心矛盾。

关键技术方法包括：1）采用SpyCatcher/SpyTag等位点特异性连接技术构建模块化平台；2）利用原子力显微镜（AFM）表征分子结构；3）通过FcRn介导的细胞循环模型评估药代动力学；4）建立人源化乳腺癌原位小鼠模型（含人外周血单核细胞PBMCs）验证疗效；5）使用时间推移显微成像动态观察T细胞杀伤过程。

平台设计与构建

研究人员设计了两大核心模块：包含CD3靶向OKT3单链抗体（scFv）和人血清白蛋白的SpyCatcher-OKT3-Albumin，以及抗EGFR纳米抗体Nb 11与SpyTag的融合蛋白。原子力显微镜显示模块组装后分子尺寸从6.7±1.3 nm增加至6.9±0.8 nm，证实了完整结构（Albu-Catch-T）的成功构建。

FcRn驱动的药代动力学优化

在表达FcRn的微血管内皮细胞模型中，Albu-Catch-T显示出显著增强的细胞循环能力。小鼠药代动力学实验证实其半衰期较未连接组分延长1.93-6.04倍，体现了白蛋白-FcRn相互作用对半衰期延伸的关键作用。p<0.0001,ns-no significance.c In vitro cancer cell lysis induction on addition of either Nb 11-SpyTag,SpyCatcher-OKT3-Albumin or Albu-Catch-T with human PBMCs mixed with MDA-MB-231 cells at a E:T ratio of 10:1. A one-way ANOVA with multiple comparisons and Turkey's post hoc correction was used to investigate statistical differences between the constructsp<0.0001,ns-no significance. Microscopic time-lapse imaging of Albu-Catch-T activated T-cell-mediated killing of target MDA-MB-231 cells(Dil(Red)labelled) by human PBMCs(CFSE(Green) labelled).d In vivo efficacy in a humanised breast cancer orthotopic BALB/c nude mouse model. At day 10,either PBS,Cetuximab,Nb 11-SpyTag,SpyCatcher-OKT3-Albumin, or Albu-Catch-T mixed with PBMCs were injected(200μL volume containing 666.67 mole protein) into the tail veins every 3 days for a total of 6 doses(Albu-Catch-T,Cetuximab,Nb 11-SpyTag,and SpyCatcher-OKT3-Albumin groups, N=6;PBS group, N=4).Tumour volumes were recorded every 3 days from day 10 and normalised to day 10 to show tumour volume fold-increase. At day 20 isolated tumour tissue was weighed. Generalised linear mixed models were used to investigate statistical differences between the constructs,p<0.0001,p<0.001,p<0.01,p<0.1,ns-no significance'>

体外T细胞激活与肿瘤杀伤

在EGFR阳性三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231模型中，Albu-Catch-T展现出剂量依赖性杀伤效应。时间推移显微成像生动记录了约10个PBMCs包围单个癌细胞的动态过程，目标细胞在100分钟内发生凋亡，直观展示了T细胞介导的细胞毒性作用。

体内抗肿瘤疗效验证

在人源化乳腺癌原位小鼠模型中，Albu-Catch-T治疗组（每3天给药，共6次）较西妥昔单抗显示出更强的肿瘤抑制效果（p<0.0001）。肿瘤体积增长倍数和重量均显著降低，且治疗期间小鼠体重稳定，主要器官病理学及肝功能指标（ALT、AST）均在正常范围，证实了良好的生物相容性。

平台可扩展性验证

研究人员进一步使用另一种EGFR靶向纳米抗体（Nb 7D12）成功构建了Albu-Catch-T(Nb 7D12)，并在体外实验中验证其细胞毒性，证明了平台适配不同靶向模块的灵活性。

该研究通过模块化设计理念成功解决了T细胞衔接器个性化应用的技术瓶颈。平台独特的"捕获-释放"机制不仅实现了靶向模块的快速更换，更通过白蛋白-FcRn循环系统显著延长了半衰期。研究结果表明，这种策略能有效平衡治疗效率与个性化需求，为癌症免疫治疗提供了新的技术范式。未来通过整合更多肿瘤特异性靶点，该平台有望成为加速个体化T细胞衔接器临床转化的高效筛选工具。