《Experimental Hematology》：Evaluation of dual BCL-2/BCL-XL inhibition in AML preclinical models with and without prior venetoclax therapy
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AML治疗依赖BCL-2抑制，但BCL-XL上调导致耐药。本研究验证双BCL-2/BCL-XL抑制剂AZD4320及其与标准疗法联用可克服耐药，显著降低白血病细胞并改善生存。
Reecha Shah | Nathan Kingston | Giulia Fabbri | Jamal Saeh | Courtney Andersen | Patricia Cheung
阿斯利康公司，加州南旧金山分部，转化医学与血液学研发部门
摘要
急性髓系白血病（AML）是一种侵袭性血液系统恶性肿瘤，其生存严重依赖于抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2（BCL-2）。Venetoclax是一种BCL-2抑制剂，利用了这种依赖性，目前已被批准用于治疗老年AML患者。BCL-2家族中的另一种促生存蛋白BCL-XL被认为是导致对Venetoclax内在性和获得性耐药性的关键因素。患者常常通过上调BCL-XL而产生对BCL-2抑制的耐药性。本研究探讨了一种双重BCL-2/BCL-XL抑制剂及其与标准治疗（SOC）联合使用的疗效。该抑制剂在AML细胞系和患者来源的模型中表现出强大的活性，包括在经过Venetoclax治疗后复发的患者样本中也是如此。与SOC药物的联合使用在体外和体内均增强了抗白血病效果。在测试的联合方案中，阿糖胞苷或低甲基化药物（HMA）能够显著减少曾接受过Venetoclax治疗的患者样本中的原始细胞数量，并改善了接受过Venetoclax/5-氮胞苷治疗的AML患者来源异种移植模型的生存率。这些临床前发现支持了对AML患者（尤其是对Venetoclax无反应的患者）进行双重BCL-2/BCL-XL抑制的临床评估。
引言
急性髓系白血病（AML）是一组高度异质性的疾病，主要影响老年患者。由于分子层面的复杂性以及老年患者对化疗的耐受性较差，治疗AML面临重大挑战。针对AML中BCL-2依赖性的策略彻底改变了这一难治性患者群体的治疗方案。Venetoclax作为一种BCL-2抑制剂，目前作为一线疗法与阿扎胞苷、地西他滨或低剂量阿糖胞苷联合使用，适用于新诊断的AML患者或不适合接受强化化疗的老年患者。尽管Venetoclax单药治疗的整体反应率仅为19%，但与5-氮胞苷或低剂量阿糖胞苷联合使用时，疗效有所提升（VIALE-A试验中反应率为66.4%，VIALE-C试验中为48%）。然而，大约30%的新诊断AML患者对基于Venetoclax的方案无反应，且最初对Venetoclax治疗有反应的患者中约有半数最终会复发。因此，探索替代治疗方法以克服Venetoclax的内在性和获得性耐药性对于改善AML患者的预后至关重要。研究发现，BCL-XL的上调是导致Venetoclax耐药性的一个机制。
细胞培养
本研究使用的AML细胞系（n=26）购自ATCC或DSMZ。这些细胞系经检测不含支原体。细胞系的身份通过短串联重复序列分析得到确认。细胞在37°C下培养。
双重BCL-2/BCL-XL抑制剂在AML细胞系和暴露于Venetoclax的AML原代样本中的细胞毒性优于Venetoclax
AZD0466是一种双重BCL-2/BCL-XL抑制剂，此前已在多种血液系统癌症模型中显示出抗肿瘤活性。在本研究中，AZD4320（AZD0466的活性成分）在AML细胞系中诱导了caspase活化，其效力明显优于Venetoclax（图1A）。此外，对Venetoclax不敏感的AML细胞系（EC50 > 30 μM）对AZD4320敏感，其caspase EC50值低于1 μM。我们进一步评估并比较了这两种抑制剂的活性。
讨论
随着基于Venetoclax的方案逐渐成为AML的一线治疗手段，迫切需要创新疗法来预防和有效克服Venetoclax耐药性。研究表明，同时抑制BCL-2和BCL-XL可能增强治疗效果并对抗Venetoclax耐药性。我们的研究旨在探讨这一机制。
致谢
作者感谢阿斯利康公司的Amanda Robichaud、Anjan Motamarry和Lori Chan在实验研究中的支持。
