哈萨克斯坦三个地区成人抗Ascaris IgG血清流行率及ELISA检测性能评估

《Life》：Anti-Ascaris IgG Seroprevalence and ELISA Performance Among Adults in Three Regions of Kazakhstan

区域调查有助于表征成人对Ascaris的暴露，并评估不同实验室标志物的解释。本横断面研究于2025—2026年检查了来自Akmola、Pavlodar和North Kazakhstan地区的2001名志愿者。研究人员收集问卷数据，并使用MVA GROUP IgG ELISA（酶联免疫吸附试验）和Kato–Katz法（Kato–Katz method）检测配对的血清和粪便标本。采用多变量logistic回归（multivariable logistic regression）评估与血清阳性的关联，并将300份选择的血清与DRG Ascaris IgG ELISA进行比较。总血清流行率（seroprevalence）为28.0%（95% CI：26.1–30.0%），在校正年龄、性别、居住地和采样年份后，地区差异仍存在。Kato–Katz阳性率为8.4%，无显著地区差异。相对于Kato–Katz，ELISA的灵敏度和特异度分别为85.2%和77.2%。与DRG的一致性为95.0%（κ = 0.900）。这些发现支持进一步开展成人暴露的区域评估。ELISA之间的一致性支持在所选样本组中进行一致的抗体分类，而与Kato–Katz的不一致要求对抗体检测和肠道虫卵排出分别解释。

该研究关注哈萨克斯坦成人抗Ascaris IgG（免疫球蛋白G）暴露。蛔虫病由A. lumbricoides引起，WHO报告土壤传播蠕虫感染约影响15亿人，CDC估计Ascaris感染772–892百万人。1990—2021年年龄标化患病率下降75.8%，但负担分布不均，低社会经济地区最高。2024年超过883百万儿童需要预防性化疗，仅506.6百万接受，全球覆盖57.4%。传播与生活史相关：感染通过摄入环境中胚胎卵发生，卵需在环境成熟，不直接人传人；幼虫经肝、肺移行后回小肠。轻感染多无症状，重感染可致腹部症状、儿童生长受损、肠梗阻或成虫移行至胆胰管。卵可在土壤长期存活，感染者造成环境污染。风险还取决于环境和卫生条件；Ascaris卵可在卫生覆盖较高的城市社区土壤和粪便污泥中检出，蔬果也可污染，A. lumbricoides是新鲜农产品常见蠕虫之一。因此卫生、水、土壤接触和食品处理应作为独立暴露因素，与One Health（同一健康）相关。成人调查可提供人类暴露数据。诊断方法影响患病率估计：Kato–Katz是WHO推荐粪微镜参考方法，直接检测虫卵排出和感染强度，但低产卵和单样本可影响检测；血清学检测宿主免疫反应，抗Ascaris IgG可指示既往或当前暴露，包括无虫卵排出者，但抗体可感染后持续并与相关蠕虫抗原反应，血清阳性不确认活动性肠道感染。哈萨克斯坦成人抗Ascaris IgG血清流行率信息有限。既往研究在Almaty和Almaty Region检查血清学与粪微镜关系，并描述MVA GROUP ELISA应用。本研究在Akmola、Pavlodar和North Kazakhstan地区纳入2001名成人，旨在确定区域抗Ascaris IgG血清流行率，检查人口学和问卷变量，以Kato–Katz为参考评估MVA GROUP ELISA，并评估与商业DRG ELISA一致性。

研究人员开展多区域横断面血清流行病学调查，2025年1月至2026年5月实施。成人志愿者经非概率抽样招募，纳入年龄≥18岁、居住研究地区、完成问卷并提供配对静脉血和粪便者，过去3个月接受驱虫治疗者不纳入。最终分析2001人：Akmola 1001，Pavlodar 500，North Kazakhstan 500；估计未加权代表区域人群。研究得出：总体血清阳性28.0%，校正后地区差异仍存在；Kato–Katz阳性8.4%，无显著地区差异；MVA GROUP ELISA相对Kato–Katz灵敏度85.2%，特异度77.2%；与DRG一致性95.0%（κ=0.900）。意义在于支持进一步区域评估成人暴露，ELISA一致性支持所选样本组抗体分类一致，而与Kato–Katz不一致要求对抗体检测和肠道虫卵排出分别解释。

关键技术方法概括：研究于2025—2026年在哈萨克斯坦Akmola、Pavlodar和North Kazakhstan地区开展；成人志愿者非概率抽样，最终分析2001人（Akmola 1001，Pavlodar 500，North Kazakhstan 500）。收集问卷和配对静脉血、粪便。血清用MVA GROUP IgG ELISA，粪便用Kato–Katz厚涂片镜检；以Kato–Katz为参考评估诊断性能。另选300份血清（每地区100份，150份MVA阳性、150份非阳性）与DRG Ascaris IgG ELISA比较。统计分析包括Wilson 95% CI、Pearson χ²检验、Fisher精确检验、多变量logistic回归估计aOR，以及Cohen’s κ和McNemar检验。

研究结果如下。3.1 研究人群特征：分析2001人，女性1327人（66.3%），平均年龄47.2±15.2岁。North Kazakhstan平均年龄最高51.5±15.3岁，Akmola 45.0±14.7岁，Pavlodar 47.2±15.2岁。城市居住1739人（86.9%）。农村居住North Kazakhstan 46.6%，Akmola 1.6%，Pavlodar 2.0%。3.2 区域血清学和粪微镜检结果：抗Ascaris IgG阳性561/2001，28.0%（95% CI 26.1–30.0%）。Akmola 31.3%（313/1001；95% CI 28.5–34.2%），Pavlodar 33.8%（169/500；95% CI 29.8–38.1%），North Kazakhstan 15.8%（79/500；95% CI 12.9–19.3%）。总体地区差异显著（χ²=50.52，df=2，p<0.001）；Akmola与Pavlodar未校正比较无显著差异（OR 1.12；95% CI 0.89–1.41；p=0.322）。Kato–Katz阳性169/2001，8.4%（95% CI 7.3–9.7%）：Akmola 8.1%，Pavlodar 10.6%，North Kazakhstan 7.0%，地区差异不显著（χ²=4.51，df=2，p=0.105）。3.3 相对于Kato–Katz的诊断性能：多数Kato–Katz阳性者ELISA阳性；不一致主要发生在ELISA阳性但无可检测虫卵者，导致阳性预测值低于灵敏度和阴性预测值。ELISA灵敏度85.2%，特异度77.2%。3.4 人口学和问卷关联：女性与男性血清阳性相似（28.2% vs 27.7%；p=0.836）；年龄组范围25.5%–29.7%（p=0.671）。校正年龄、性别、居住地、采样年份后，Akmola（aOR 2.30；95% CI 1.59–3.33）和Pavlodar（aOR 2.37；95% CI 1.51–3.73）高于North Kazakhstan（均p<0.001）；其他人口学协变量不显著。猫、狗、家畜拥有分别806人（40.3%）、534人（26.7%）、395人（19.7%）。1977名有饮食信息者中，121人（6.1%）报告食用未洗蔬菜，68人（3.4%）报告生肉。狗拥有粗关联OR 0.69（95% CI 0.55–0.87），校正后消失（aOR 0.99；95% CI 0.76–1.29）。无问卷变量显示合并校正显著关联（均p≥0.097）；未洗蔬菜合并校正aOR 1.44（95% CI 0.94–2.21；p=0.097），区域估计不同。3.5 与DRG ELISA一致性：两种ELISA在所选血清组中呈高定性一致性；不一致分类几乎均匀分布，McNemar检验未发现方向不平衡。总体一致性95.0%（κ=0.900）；300份标本均获明确阳性或阴性DRG结果，未见equivocal结果。

讨论部分总结：本研究扩展既往Almaty和Almaty Region调查，检查三个额外地区成人Ascaris暴露。区域血清学模式在校正测量人口学特征和采样年份后仍存在，提示这些特征未完全解释招募组间差异。国家监测继续记录哈萨克斯坦蛔虫病，本研究增加常规病例检测之外成人抗体反应信息。与粪便检查比较显示，区域血清流行率和可检测肠道虫卵排出流行率需分别解释。Akmola和Pavlodar较高血清阳性支持进一步调查局部暴露条件。地理变异已有记录，卫生、食品供应和影响虫卵存活的环境条件可能贡献。但North Kazakhstan农村参与者比例最大而血清阳性最低，故单纯农村居住不能解释。家庭卫生、食品处理、既往居住和家庭外暴露可能比行政城乡分类更有信息。问卷未识别单一解释；动物拥有不直接测量感染性虫卵暴露，菜园准入对种植或卫生实践信息少，水源类别不描述处理或储存。狗拥有粗关联校正后消失说明参与者特征影响比较。污染蔬菜仍是生物学合理来源。Akmola未洗蔬菜关联未在其他区域重现，合并校正分析未确立，解释为探索性。年龄组和性别血清阳性相似提示暴露评估应跨人口群体。生肉变量超出常规肠道蛔虫病，原文讨论其与Toxocara和A. suum等考虑相关，但本研究未证明生肉消费关联或肉源感染。抗体阳性多于卵阳性与ELISA和Kato–Katz测量不同生物过程一致：抗体可在既往暴露后持续，幼虫在产卵成虫前经历组织移行，重复暴露可维持抗体反应而无入组时卵阳性；抗体阳性而无虫卵不能单独确定幼虫感染或paratenic host。低产卵和抗体反应变异亦解释不一致。交叉反应可能贡献不一致，但未量化。诊断性能描述MVA GROUP检测相对于Kato–Katz检测产卵感染的分类；大多数粪便阳性者检出抗体，但较低阳性预测值显示阳性抗体不能等同于当前产卵。与DRG一致性处理抗体分类一致性，应与相对粪微镜性能区分。两种ELISA均使用抗原包被孔、过氧化物酶检测和四甲基联苯胺显色；MVA GROUP使用抗人IgG缀合物，DRG说明指定过氧化物酶标记Protein A，血清稀释、孵育条件和cutoff计算不同。重叠抗体反应可解释高定性一致性。研究优势为配对学生血清、粪便与个人问卷数据；限制为志愿者招募不提供人群代表性区域估计，自报实践可能不同于感染时，采样年份地区间仅部分重叠。未来需一致招募、暴露问题和实验室程序，并连接人类调查与食品、水、环境污染调查，符合One Health。

结论翻译：抗Ascaris IgG血清阳性在Akmola和Pavlodar志愿者样本中高于North Kazakhstan，包括校正测量人口学特征和采样年份后。与DRG的一致性支持所选比较组中一致的抗体分类。与Kato–Katz比较显示，抗体阳性和可检测肠道虫卵排出需要分别解释。这些发现支持进一步区域研究，结合暴露评估与粪便检查。