circINHBA：一种由EIF4A3调控的竞争性内源RNA抑制猪颗粒细胞凋亡

《Molecular and Cellular Endocrinology》：circINHBA: an EIF4A3-governed ceRNA suppresses porcine granulosa cell apoptosis

• 鉴定出一种新型稳定的环状 RNA circINHBA，其在健康猪卵泡中高表达。• circINHBA 敲低促进 GC 凋亡并降低 BCL2/BAX 比值• circINHBA 作为 miR-196b-5p 的分子海绵，提高 PARP8 表达• circINHBA/miR-196b-5p/PARP8 轴抑制 GC 凋亡• EIF4A3 与 circINHBA 物理结合，可能促进其在猪 GC 中的生物发生和稳定性。**章节摘要****背景**在哺乳动物中，卵巢卵泡闭锁是一个保守的生理过程，决定了繁殖效率和排卵率。超过 99% 的卵巢 follicles 在卵泡发育期间发生闭锁 (1)。颗粒细胞 (GCs) 为卵母细胞生长提供结构、代谢和内分泌支持，GC 凋亡直接引发并执行卵泡闭锁 (2)。因此，揭示控制 GC 命运的后转录机制对于……**动物与样本收集**猪卵巢采集自当地屠宰场约 180 日龄的青春期前小母猪。卵巢在 2 小时内于含 1% 硫酸庆大霉素的无菌生理盐水中运至实验室。解剖窦状卵泡 (3-5 毫米)，并根据如前所述 (10) 的形态学标准、GC 密度和雌二醇/孕酮 (E2/P4) 比值对健康和早期闭锁卵泡进行分类。简而言之，具有清晰……**circINHBA 的鉴定与表征**先前的 circRNA 测序和生物信息学分析显示，circINHBA 是一种 494 bp 的环状 RNA，由 INHBA 基因 (chr18:52899592-52900085) 的外显子 2 反向剪接产生 (图 1A)。circINHBA 在健康卵泡 (HF) 中的表达显著高于在闭锁卵泡 (AF) 中 (图 1B)。为了确认其环状结构，我们进行了 RNase R 消化实验。虽然线性 *INHBA* mRNA 被显著降解，但 circINHBA 仍对 RNase R 处理具有抗性，确认了其环状结构 (图 1C)。**讨论**卵泡闭锁是一个由多种因素协调的复杂过程，包括激素信号、氧化应激、自噬和死亡受体通路 (11)。经典凋亡通路直接调节执行蛋白，如 caspases 和 *BCL2* 家族成员 (2)。相比之下，我们鉴定并系统验证了 EIF4A3/circINHBA/miR-196b-5p/PARP8 调控轴，该轴通过 circRNA-miRNA-mRNA 级联间接但稳定地发挥作用，形成一个长期的抗凋亡模块。**结论**总之，本研究鉴定并系统验证了 EIF4A3/circINHBA/miR-196b-5p/PARP8 通路在调节猪卵巢 GC 凋亡中的关键作用。circINHBA 作为 miR-196b-5p 的分子海绵，减轻了其对 *PARP8* 的抑制，从而增强 GC 存活。在上游，EIF4A3 促进 circINHBA 的生物发生和稳定性，强化了这种抗凋亡效应。该调控轴突显了……**CRediT 作者贡献声明****潘增祥：** 写作 - 审阅与编辑，监督，获取资金，概念构思。 **刘景歌：** 写作 - 审阅与编辑，方法学。 **王彩霞：** 写作 - 审阅与编辑，写作 - 原稿，验证，方法学，调查。 **张金碧：** 写作 - 审阅与编辑，写作 - 原稿，验证，调查，获取资金。 **高佳鑫：** 可视化，验证。 **吴佳怡：** 写作 - 审阅与编辑，调查，数据整理。**伦理批准与参与同意**本研究按照动物护理和使用管理指南进行，并获得了中国江苏南京南京农业大学动物伦理委员会的批准 (SYXK2021-0045, 2021 年 12 月 6 日)。**数据和材料的可用性**本研究中生成或分析的所有数据均包含在已发表的文章及其补充信息文件中。进一步询问请联系通讯作者。**利益冲突**作者声明没有利益冲突。**资金支持**本研究得到了**国家自然科学基金** (资助号 32573219 和 31672421)、江苏省高校青蓝项目以及**金陵**科技学院科研基金的资助 (资助号 jit-b-202126)。**利益冲突声明**? 作者声明没有已知的竞争性财务利益或个人关系，这些利益或关系可能会影响本文所报告的工作。张金碧 | 王彩霞 | 吴佳怡 | 高佳鑫 | 刘景歌 | 潘增祥