《Nature Metabolism》：Senolytics dasatinib and quercetin in metabolic dysfunction-associated steatohepatitis: a proof-of-principle randomized, controlled trial
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细胞衰老（cellular senescence, CS）在肝脏炎症与纤维化中发挥重要作用。然而，细胞衰老是否可作为人类代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（metabolic dysfunction-associated steatohepatitis, MASH）的
细胞衰老（cellular senescence, CS）在肝脏炎症与纤维化中发挥重要作用。然而，细胞衰老是否可作为人类代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（metabolic dysfunction-associated steatohepatitis, MASH）的潜在治疗靶点仍未被探索。研究人员报告了一项2期、双盲、随机、安慰剂对照试验，评估间歇性衰老细胞溶解（senolytic）治疗达沙替尼（dasatinib）联合槲皮素（quercetin）（D+Q）在纤维化性MASH受试者中的效果。31名受试者（中位年龄56岁；76%为男性；58%患2型糖尿病）按1:1随机接受D+Q（达沙替尼100 mg/日加槲皮素1,000 mg/日）或安慰剂，每周连续3天给药，持续3周，重复3个7周周期。主要终点为配对肝活检显示纤维化至少改善1期且MASH不恶化：D+Q组47%达成，安慰剂组7%（P=0.02）。MASH缓解在D+Q组更常见（53%对7%；P=0.02），NAFLD活动度评分（NAFLD Activity Score, NAS）降幅更大（?1.43±1.22对?0.39±0.77；P=0.012）。单核RNA测序（single-nucleus RNA sequencing, snRNA-seq）显示D+Q组衰老与纤维化基因特征下降，促纤维化细胞群减少。尽管D+Q组不良事件更多（82%对43%），但均为自限性。该概念验证试验支持未来在纤维化性MASH中开展衰老细胞溶解治疗试验。
研究背景方面，代谢功能障碍相关脂肪性肝病（metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease, MASLD）全球患病率近40%，其进展形式代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）可导致肝纤维化、肝硬化与肝细胞癌。肝纤维化是预测肝相关并发症和死亡的最关键因素。已有临床前研究提示，肝细胞与肝星状细胞（hepatic stellate cell, HSC）可在MASH中进入衰老状态，而衰老细胞通过衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype, SASP）释放促炎促纤维化因子，推动慢性炎症与组织重塑。但人类MASH中，药物清除衰老细胞能否改变组织学疾病严重度此前未被确立，因此研究人员开展本项概念验证研究。
本研究为阿姆斯特丹大学医学中心开展的2期、单中心、双盲、随机、安慰剂对照试验，受试者为活检证实的纤维化性MASH（F2-F3）成人。研究人员将受试者按1:1随机至D+Q组或安慰剂组，D+Q方案为达沙替尼100 mg/日加槲皮素1,000 mg/日，每周3天、连服3周，继以4周停药，7周为一周期，共3周期、总时长21周。主要终点为SAF评分下纤维化至少改善1期且不伴MASH恶化。结果显示D+Q组47%达标，安慰剂组7%（P=0.021）；MASH缓解率53%对7%（P=0.02）；NAS降幅?1对比0（P=0.012）；SAF活动度（SAF-A）评分改善率65%对21%（P=0.041）。该文发表于《Nature Metabolism》，意义在于首次在人体证明靶向细胞衰老可带来MASH组织学改善，并为抗衰老（anti-aging）干预进入代谢肝病治疗提供分子与组织学证据。
关键技术方法上，研究人员采用单中心随机对照试验设计，样本为荷兰经活检证实的F2-F3纤维化性MASH队列；以配对肝活检进行盲态中心阅片；用10x平台开展单核RNA测序（snRNA-seq）并对冷冻肝组织进行细胞类型注释、基因集富集与细胞比例建模；统计上以意向治疗（intention-to-treat, ITT）分析二分类终点，以协方差分析（ANCOVA）校正基线糖尿病、体重与纤维化期。
结果部分如下。
Results：研究人员在31例随机人群中分析主要终点，D+Q组纤维化改善应答率为47%，安慰剂组7%，相对风险6.59；MASH缓解、NAS与SAF-A连续变量分析均支持D+Q优于安慰剂；Elucidating Pathways of Steatohepatitis（EPoS）纤维化评分改善未达显著（P=0.068）。snRNA-seq显示SenMayo与衰老肝细胞基因集（senescent hepatocyte gene signature, SHGS）在D+Q组治疗后显著负富集，纤维化基因集（含COL1A1、COL1A2、TGFB1、ACTA2）也显著下调；混合效应模型证实HSC与免疫细胞比例下降，肝细胞比例上升。临床实验室终点中，eGFR改善但敏感性分析不稳健，血小板下降具显著性；肝酶、胰岛素耐药与肝硬度无创指标组间无显著差异。不良事件方面，D+Q组82%发生不良事件，多为头痛、轻中度感染与胃肠不适，无骨髓抑制或QTc延长；生活质量问卷中SF-36总体健康域改善。缺失活检数据的敏感性分析显示治疗效应方向一致，最保守情景下P=0.068。
讨论部分总结：研究人员指出，D+Q的 antifibrotic 效应可能不仅来自脂肪性肝炎缓解，还通过降低HSC与免疫细胞负荷、抑制促纤维化转录程序实现；达沙替尼对骨髓造血的影响可能减少炎症细胞肝内浸润，但属推测。单核转录组未见p53信号或肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）相关KEGG通路富集，提示短期清除衰老肝细胞未出现明确致癌信号。研究人员强调21周即可见组织学改善说明衰老细胞清除具快速病理生理效应，但样本小、置信区间宽、缺访偏倚使结论为假设生成而非确证。未来需扩大队列、优化周期数、停药间隔与长期安全性。
研究结论部分翻译：在这项2期双盲随机对照试验中，21周内间歇性D+Q治疗与纤维化改善且MASH不恶化相关，该结果由盲态中心阅片确认。这些发现支持细胞衰老参与MASH肝脏炎症与纤维化。单核RNA测序数据提示D+Q可调节肝内促纤维化细胞群与促纤维化转录程序，而不只是继发于脂肪性肝炎消退。本研究首次提供人体证据：靶向细胞衰老可作为纤维化性MASH的治疗策略；但受样本量小与随访短限制，结论需更大试验复制。未来试验应明确最佳剂量、受试者选择、应答持久性与长期安全性。
