《Cosmetics》：Efficacy and Tolerability of a Topical Gel Containing Milk-Derived miRNA-Enriched Exosomes in Androgenetic Alopecia and Telogen Effluvium: A 12-Week Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial
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雄激素性秃发（androgenetic alopecia, AGA）和慢性休止期脱发（chronic telogen effluvium, TE）是常见脱发疾病，具有显著心理社会影响，并且除米诺地尔外有效的局部选择有限。微RNA（microRNAs, miRN
雄激素性秃发（androgenetic alopecia, AGA）和慢性休止期脱发（chronic telogen effluvium, TE）是常见脱发疾病，具有显著心理社会影响，并且除米诺地尔外有效的局部选择有限。微RNA（microRNAs, miRNAs）已成为通过Wnt/β-catenin及相关通路调控毛囊周期的重要候选调节因子。在这项多中心、随机、双盲、安慰剂对照临床试验中，年龄18–60岁、患有AGA、女性AGA或TE的成年人按1:1分配，接受含牛乳来源外泌体且富集特定miRNAs的局部凝胶（MEV-miRNA凝胶）或安慰剂，每周一次，持续12周。主要终点为第8周和第12周与基线相比，通过数字照片毛囊图（digital photo-trichogram）评估的生长期毛发百分比、生长期/休止期比值和毛干直径变化；次要终点包括患者报告结局、整体临床评估以及安全性/耐受性。40例随机受试者中，39例（97.5%）完成研究。在MEV-miRNA凝胶组，生长期毛发百分比从基线58%增至第8周70%和第12周78%，同时生长期/休止期比值相应改善（从1.45至2.46和3.63），平均毛干直径亦改善（从47.5 μm至65.3 μm和70.6 μm；所有p < 0.05，与基线和安慰剂相比）。安慰剂组毛镜参数未见显著变化。第12周时，大多数MEV-miRNA治疗患者报告头发更强韧、脱发减少和整体毛发质量改善，满意度高，且无治疗相关严重不良事件。每周一次应用含牛乳来源微RNA富集外泌体的局部凝胶，在12周内显著改善AGA和TE的毛镜及患者报告结局，并具有良好短期耐受性。这些发现支持基于外泌体的微RNA递送作为一种新型、非药物学脱发疾病治疗方法。
研究背景：AGA、女性AGA（female androgenetic alopecia, FAGA）和慢性TE是多因素脱发疾病，全球男女均可受累，心理社会负担显著。AGA病理涉及遗传易感性、雄激素代谢、炎症介质、氧化应激和毛囊周期失调之间复杂相互作用。现有治疗选择有限，非那雄胺和米诺地尔是AGA主要获批药物，临床中还常超说明书使用口服度他雄胺、低剂量口服米诺地尔、局部非那雄胺和其他局部抗雄激素药物，但存在副作用、依从性和反应不完全等问题。TE治疗主要围绕识别和消除诱因、纠正营养或内分泌紊乱，支持性措施可包括超说明书局部或口服米诺地尔、特定情况下皮质类固醇以及多种美容或营养制剂，但稳健临床数据稀缺，尚无正式获批的非特异性靶向药物。辅助治疗如富血小板血浆、低能量光/激光、微针和特定病例毛发移植，以及外泌体产品、雄激素受体靶向或siRNA治疗等新兴方法仍在研究，尚未成为标准治疗。毛囊是动态微型器官，整合遗传、激素、环境和表观遗传信号；miRNAs是关键转录后调节因子，调控毛囊形态发生、周期再生和稳态，并影响细胞增殖、分化以及Wnt/β-catenin、胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1, IGF-1）等通路。AGA受累头皮存在不同miRNA表达模式，若干miRNAs与Wnt/β-catenin信号下调、真皮乳头细胞增殖减少和进行性滤泡微小化相关。TE的miRNA特征定义较少，但其特征为毛囊突然同步进入休止期，新数据提示应激和炎症反应性miRNAs可能通过破坏维持生长期和保护基质角质形成细胞免于凋亡的转录程序参与该病理转变。miRNA治疗面临多阴离子难以跨膜、生物液体中稳定性差和快速降解等障碍，因此外泌体尤其是乳源外泌体作为天然纳米载体，可保护和递送miRNAs。研究人员旨在评估一种新型局部凝胶（MEV-microRNA凝胶，含富集特定miRNAs的牛乳来源外泌体和SFRP1抑制剂iSFRP1）与安慰剂相比，在AGA和/或TE受试者中的疗效和耐受性。
研究人员开展了一项多中心、双盲、随机、对照临床试验，在意大利2家皮肤科诊所于2025年5月至11月实施，共筛查并纳入40例AGA、FAGA或慢性TE受试者。研究采用计算机生成随机序列按1:1分配，受试者、治疗研究者和结局评估者均保持盲法，研究产品与安慰剂在外观、质地和美容可接受性上一致。受试者每周一次将凝胶用于受累头皮区域，持续12周。结论显示，含MEV-miRNAs和iSFRP1的局部凝胶显著改善毛镜参数和患者报告结局，短期耐受性良好；这些发现支持基于外泌体的miRNA递送作为脱发疾病的新型非药物学治疗方向，但由于配方含两种活性成分，不能确定MEV-miRNAs或iSFRP1各自的相对贡献。
关键技术方法概括：研究为多中心、随机、双盲、安慰剂对照临床试验，队列来源为意大利2家皮肤科诊所，2025年5月至11月，40例AGA、FAGA或慢性TE受试者。采用计算机生成1:1随机序列，分配隐藏，受试者、治疗研究者和结局评估者盲法，产品与安慰剂外观一致。干预为每周一次局部凝胶，持续12周。疗效评估使用数字照片毛囊图、表皮发光显微镜和TrichoScan软件，评估生长期毛发百分比、生长期/休止期比值和毛干直径；同时采集标准化全局头皮照片，并自同一预设靶区以固定20×放大获取毛镜图像；使用受试者自评问卷、研究者医学检查和不良事件评估。统计使用GraphPad Prism软件，配对样本t检验、独立样本t检验，并对基线差异采用以治疗组为固定因素、基线值为协变量的协方差分析（analysis of covariance, ANCOVA），必要时以Holm–Bonferroni校正。
3. Results：基线临床和人口学特征总结显示，40例受试者被随机分配；1例MEV-miRNA/iSFRP1凝胶组受试者在基线评估后因诊断斑秃而被排除，最终39例（97.5%）完成研究并构成疗效和安全性分析人群。通过数字照片毛囊图和TrichoScan评估发现，MEV-miRNA/iSFRP1凝胶组所有毛镜参数在第8周和第12周均显著改善。生长期毛发百分比从基线58.15 ± 1.67（mean ± SEM）升至第8周70.37 ± 1.05和第12周77.73 ± 0.86（均p < 0.001 vs. 基线）；安慰剂组虽有小幅数值增加，但无统计学显著变化。基线值在组间存在差异（58.15% vs. 安慰剂68.31%），因此进行校正分析。与安慰剂相比，MEV-miRNA/iSFRP1凝胶组生长期毛发百分比自基线变化在第8周为+23 ± 4% vs. +4 ± 2%，第12周为+36 ± 5% vs. +3 ± 2%；第12周在未校正和校正分析中均达统计学显著（校正p < 0.001），第8周仅在以ANCOVA校正基线值并采用Holm–Bonferroni校正后显著（校正p < 0.001）。生长期/休止期比值在MEV-miRNA/iSFRP1凝胶组从基线1.45 ± 0.09升至第8周2.46 ± 0.13和第12周3.63 ± 0.20（所有组内比较p < 0.001），相对增加分别为+80 ± 14%和+173 ± 28%，安慰剂组为+6 ± 3%和+11 ± 7%；ANCOVA校正基线值并经Holm–Bonferroni校正后，两个时间点组间差异均显著（校正p < 0.001）。毛干直径在MEV-miRNA/iSFRP1凝胶组从基线47.54 ± 2.64 μm升至第8周65.26 ± 3.10 μm和第12周70.63 ± 2.27 μm，而安慰剂组仅见轻微非显著变化（分别为46.00 ± 2.11 μm、47.00 ± 1.74 μm和48.44 ± 2.52 μm）；相对增加为+50 ± 12%和+62 ± 10% vs. 安慰剂+3 ± 2%和+7 ± 4%，第8周校正p = 0.001，第12周校正p < 0.001。第12周患者自评结局支持MEV-miRNA/iSFRP1凝胶，89.47%报告头发更强韧，89.47%报告头发密度更高，94.74%报告毛发质量改善，89.47%总体满意。两组均未报告产品相关临床体征或不适。代表性受试者图像显示MEV-miRNA/iSFRP1凝胶治疗在基线与3个月后的改善；研究未具备按诊断建立疗效差异的统计效力。安全性方面，研究期间未观察到治疗相关不良事件、过敏反应、红斑、水肿或局部不耐受反应。
4. Discussion：讨论指出，本研究显示反映毛囊周期动态和毛发纤维产生的客观参数出现一致变化，这些临床观察扩展了既往实验发现。既往在人体毛囊模型中独立于SFRP1抑制评估MEV-miRNA平台，显示其具有生物学活性并调节Wnt相关信号多个组分，这为实验活性与体内临床反应之间提供了转化联系。但由于临床配方也含SFRP1抑制剂，本研究无法确定两种成分的相对贡献，也不能确定仅miRNAs导致临床效应。该随机、双盲、安慰剂对照研究提供临床概念验证，即含MEV-miRNAs和iSFRP1的局部配方可在AGA和TE受试者中诱导毛囊功能客观参数的可测变化；重要的是，本试验确立的是完整配方的疗效，不能将观察到的临床效应归因于MEV-miRNAs或iSFRP1单独。由于部分疗效变量存在显著基线差异，研究人员进行ANCOVA以基线值为协变量，结果确认活性配方优于安慰剂，表明观察效应并非源于组间基线不平衡。这些体内发现与既往体外数据一致：相同牛乳来源外泌体制剂增强人真皮乳头细胞活力并上调器官培养人毛囊中Wnt相关基因。但研究未对受试者进行分子评估，因此Wnt/β-catenin通路参与应视为生物学上合理的假设，而非本临床试验中直接证明的机制。观察到的生长期毛发百分比增加、生长期/休止期比值改善和毛干直径增加，与既往实验性毛囊模型中记录的生物学效应一致，但直接确认这些分子机制超出本研究范围。该策略核心是牛乳来源外泌体携带的特定miRNA指纹，主要属于Let-7、miR-21、miR-30、miR-200和miR-148/152家族，这些家族具有保守人类直系同源物并参与毛囊发育和周期。实验和转化研究表明，这些miRNAs可通过Wnt/β-catenin、TGF-β和BMP信号通路调节毛囊干细胞和真皮乳头细胞增殖、凋亡和分化，而这些通路已知在AGA和TE中改变。通过生理性囊泡载体递送协调的miRNA特征，牛乳来源外泌体可能促进调节性miRNAs的稳定性和细胞递送，这为观察到的临床发现提供生物学上合理的解释，但本研究未研究直接靶点结合。临床上，观察到的反应模式——生长期毛囊比例升高、生长期/休止期比值改善、毛干直径增加并伴感知脱发显著减少——与参与毛囊周期和真皮乳头功能的生物学通路调节一致。在AGA中，Wnt信号受损和真皮乳头增殖能力降低是进行性滤泡微小化的公认因素；在TE中，毛囊突然进入休止期与应激反应通路相关，包括可能破坏生长期维持的miRNA介导调节机制。尽管本临床研究未直接研究潜在分子机制，观察到的临床改善与以下假设一致：毛囊相关调节网络调节可能有助于毛囊周期动态正常化。本研究报告的高水平患者满意度和良好短期耐受性支持在更大规模对照临床试验中进一步研究该方法。由于未设活性对照臂，无法与已建立的药理学、美容或再生干预进行直接比较。重要的是，12周治疗期间未观察到治疗相关不良事件、过敏反应或因局部不耐受导致的停药。但研究存在局限性：样本量较小，治疗时间相对较短，可能低估毛囊重塑的全部潜力，尤其是在长期AGA中。另一局限是研究未前瞻性注册；尽管方案、随机程序、盲法和统计分析均有详细描述，前瞻性注册将进一步增强方法学透明度，未来确认性研究将在入组前进行前瞻性试验注册。此外，未进行头皮活检或分子生物标志物评估，因此直接确认观察到的临床效应背后的生物学机制超出本研究范围。纳入AGA和TE反映临床现实，但不能对每个表型的疗效差异作出明确结论；这些疾病虽共享毛囊周期和滤泡功能改变，但潜在病理生理不同，可能对治疗反应不同。因研究设计为探索性概念验证试验且未具备亚组比较统计效力，疗效结局未按脱发亚型分别分析，结果应解释为非瘢痕性脱发异质人群中的初步证据；未来需按诊断分层且具有足够效力的研究，以更好描述适应证特异性治疗效应。尽管疗效评估在临床相关时间点第8周和第12周进行，未来研究增加中间评估可能有助于进一步描述治疗反应时间动态并确定最早可检测临床效应。此外，研究配方含miRNA富集外泌体和iSFRP1，因此本试验确立完整配方疗效，而非任一活性成分单独疗效；根据当前设计无法确定各成分相对贡献。研究也未包括治疗后随访期，因此治疗停止后临床获益的持续性仍未知。既往发表体外数据支持该配方的机制合理性；未来需纳入分子生物标志物、离体毛囊模型或头皮组织分析的研究，以确认人体通路调节。更大规模和更长临床研究，最好纳入诊断特异性分层和整合生物标志物方案，包括头皮转录组学、miRNA谱分析和通路相关靶点免疫染色，将重要用于进一步研究观察临床效应的生物学机制并完善解释。尽管有这些局限，实验和临床观察之间的一致性支持进一步研究基于miRNA的调节策略用于脱发疾病。由于miRNAs能够调节多个相互关联信号网络，其在毛囊生物学转化研究中具有吸引力。在此背景下，牛乳来源外泌体作为递送载体可能提供若干理论优势，包括生物相容性、保护分子货物免于降解以及局部给药的潜力。随着对AGA和TE相关miRNA特征认识不断发展，基于外泌体的配方可能为开发靶向毛囊功能的新型局部方法提供有用机会；然而，特定分子通路的临床相关性及配方各组分独立贡献仍需进一步研究。
5. Conclusions：在这项多中心、随机、双盲、安慰剂对照试验中，每周一次含牛乳来源微RNA富集外泌体的局部凝胶（MEV-miRNA/iSFRP1）与安慰剂相比，显著改善成人雄激素性秃发和慢性休止期脱发的定量毛镜参数，包括生长期毛发百分比、生长期/休止期比值和毛干直径。这些客观变化伴随高比例患者报告毛发强度、密度和整体毛发质量改善，以及良好短期耐受性特征和无治疗相关不良事件。总体而言，这些发现支持进一步研究基于外泌体的微RNA递送策略用于雄激素性秃发和休止期脱发。然而，需要更大规模研究，纳入更长随访、活性对照和机制评估，以更好定义其临床作用和治疗定位。由于研究配方含微RNA富集外泌体和iSFRP1，本研究确立完整配方的疗效，但不能确定任一活性成分单独贡献。尽管既往临床前研究支持毛囊信号通路调节的可能作用，但本临床试验未直接研究潜在生物学机制。未来需要更大样本量、更长随访期、活性对照臂、分子生物标志物评估和根据脱发亚型预定义分层的随机研究，以确认这些发现并确定治疗反应是否在AGA/FAGA和TE患者之间不同。总体而言，这些发现支持进一步研究基于外泌体的微RNA递送策略用于毛发疾病。需要进一步具有足够效力的研究，纳入更长随访、活性对照和机制评估，以更好定义其临床角色和治疗定位。
