环磷酰胺联合莱莫帕利单抗作为尤文肉瘤安全有效的替代联合治疗策略

《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》：Optimizing combinatorial macrophage induced innate immunotherapy against Ewing sarcoma

　　

摘要

背景

我们先前报道过，尤文肉瘤（ES）是一种儿童骨和软组织肿瘤，它通过上调 CD47“别吃我”信号并下调细胞表面钙网蛋白（csCRT）“吃我”信号来逃避巨噬细胞吞噬。通过结合 CD47 阻断剂马格罗利单抗（Mag）和多柔比星（Dox）（一种可增强 csCRT 表达的化疗药物）针对这种双重机制，显著增强了巨噬细胞对 ES 细胞的吞噬作用，并抑制了原位小鼠模型中移植瘤的生长和转移。然而，已知 Dox 会引起心脏毒性，且 Mag 由于靶向表达 CD47 的红细胞会诱导贫血。需要毒性更低的替代方案来优化这种联合疗法。

方法

对接受 PBS、Dox、Mag 或 Dox 联合 Mag 处理的 ES 移植瘤中分离的细胞进行单细胞 RNA 测序（scRNA-seq），以更好地了解 Dox 和 Mag 对 ES 肿瘤及其免疫微环境的影响。评估另一种 ES 标准化疗方案环磷酰胺（Cyclo）作为 Dox 的替代品，用于诱导 ES 细胞上的 csCRT 表达。使用体外吞噬试验，将下一代抗 CD47 抗体莱莫帕利单抗（Lem）（设计用于避免影响红细胞）与 Mag 进行比较，单独使用以及与 Cyclo 联合使用。利用 NSG 和人源化 NSG 宿主中的原位 ES 异种移植小鼠模型，评估 Cyclo 联合 Lem 或 Mag 的安全性和有效性。

结果

scRNA-seq 结果显示，Dox 或 Dox 联合 Mag 处理上调了巨噬细胞中与扩张型心肌病相关的细胞通路和功能。Cyclo 以剂量依赖的方式显著增强了 ES 细胞上的 csCRT 表达。体外吞噬试验表明，将 Cyclo 与 Lem 或 Mag 中的任意一种联合使用，均显著增加了巨噬细胞对 ES 细胞的吞噬作用。此外，在 NSG 异种移植小鼠模型中，Cyclo 联合 Mag 和 Cyclo 联合 Lem 均显著减少肿瘤生长和肺转移，同时延长动物生存期。重要的是，在人源化 NSG 小鼠模型中，Cyclo 联合 Mag 诱导严重贫血和动物死亡，而 Cyclo 联合 Lem 耐受性良好，显著降低肿瘤负荷并延长动物生存期。

结论

我们的临床前数据显示，Cyclo 和 Lem 的联合是一种安全有效的替代治疗策略，在 ES 患者中具有高度的临床转化潜力。