猪肺炎支原体培养体系优化与实时生长动态监测研究

《AMB Express》：Growth dynamic curve and gene expression analysis for optimized culture medium of Mycoplasma hyopneumoniae CJ strain

摘要

猪肺炎支原体是猪群体性肺炎的主要致病菌，疫苗仍是疾病控制的基石。然而，该病原体的工业化生产受到其生长速度缓慢、营养需求苛刻以及缺乏可靠实时细胞计数技术的严重限制。传统的颜色变化法检测需要14天的培养时间，重复性较差，且无法实现培养过程的动态优化。在本研究中，我们解决了以下问题：首先，配制了两种优化的基于Friis培养基的培养液CL6和GD-240；其次，开发了一个结合逻辑生长模型和流式细胞术的动态监测平台，以实现对支原体生长的实时追踪。研究确定了五个关键生长参数，动力学分析显示GD-240可使细胞总数增加17.5%，并使快速生长期延长2.7小时；第三，利用定量PCR技术明确了核心代谢基因和毒力基因的表达时间模式，例如deoB和ldh在30小时时上调，在42小时时下调。这些实用的方法学手段为支原体的培养优化和动态生理分析提供了支持。