《Scientific Reports》：Effect of herbal toothpaste versus conventional one on black stains in a group of Egyptian children: a randomized controlled study
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确定使用草本牙膏与含氟牙膏配方的儿童中牙面黑色素沉着（Black Stain, BS）的复发率，涉及染色复发、染色评分和家长满意度。将28名患有BS的儿童随机分配至两组：对照组I接受含氟牙膏（Signal Cavity Fighter?）
确定使用草本牙膏与含氟牙膏配方的儿童中牙面黑色素沉着（Black Stain, BS）的复发率，涉及染色复发、染色评分和家长满意度。将28名患有BS的儿童随机分配至两组：对照组I接受含氟牙膏（Signal Cavity Fighter?），实验组II接受草本牙膏（Dabur Red?）。在牙齿抛光和唾液样本采集后，利用定量实时聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR）测定四种细菌——变形链球菌（Streptococcus mutans, SM）、干酪乳杆菌（Lactobacillus casei, LB）、内氏放线菌（Actinomyces naeslundii, AC）和产黑普雷沃菌（Prevotella melaninogenica, PM）的水平。评估两组的染色评分变化、细菌载量降低百分比和家长满意度程度。6个月后，与对照组相比，草本组85.7%的参与者显著无染色复发（p=0.013，ω=0.53；大效应量），达到染色评分0（p=0.004，ω=0.38；小效应量），并报告满意度评分5（p=0.008，δ=?0.51；大效应量）。就细菌计数而言，对照组SM降低显著更大，而其他细菌种类的降低在草本组显著更大，均为大效应量。在本研究局限性内，与对照组相比，草本牙膏可能在提高家长满意度、降低染色复发和降低除SM外的所有纳入细菌方面显示出有前景的染色去除疗效。试验注册：本研究于2025年6月3日在Clinical Trials. gov回顾性注册，作为任何结局评估前的首次发布日期；ID：NCT06872827；https://clinicaltrials.gov/study/NCT06872827。
研究背景方面，牙面黑色素沉着（Black Stain, BS）是一种常见的外源性变色，表现为沿龈缘分布的暗色连续线或黑色斑块融合，颜色可从淡棕色至深黑或棕色。全球BS患病率为2.4%–20%，性别分布相似，儿童较成人更高发；埃及近期报告学龄儿童患病率为8.4%。BS病因尚未完全明确，但口腔内产色兼性厌氧菌定植被认为是主要贡献因素。已有观点认为，这些微生物产生的硫化氢与唾液或龈沟液中铁、铜和硫化合物发生化学过程，形成不溶性铁化合物，最可能为硫化铁，并沉积为牙面暗色色素。既往研究报道BS微生物组成以放线菌为主，产黑普雷沃菌（Prevotella melaninogenica, PM）、中间普雷沃菌和变黑普雷沃菌也被列为相关产色菌。同时，BS存在时龋患病率及龋相关细菌如变形链球菌（Streptococcus mutans, SM）和干酪乳杆菌（Lactobacillus casei, LB）可减少。尽管BS不伴功能损害，但它是儿童及其家庭寻求美观治疗的常见主诉，可能影响儿童人格、自尊和心理社会发展。BS可通过专业机械清创、抛光和喷砂去除，也可通过家用美白牙膏去除，但刷牙和基础刮治抛光后复发率高，常在30天内再形成。反复超声清洁不推荐用于牙敏感者，且可能造成表面划痕和去除表层釉质，进而导致初始脱矿或表面粗糙。近年来草本治疗受到全球关注，草本牙膏含多种成分，被认为具有治疗性牙科效果，可减少牙龈出血、口臭和细菌载量，促进口腔卫生，且未报道龋经验增加或唾液pH改变，并具有脱敏及减少外源性染色严重度和范围的作用。然而，关于草本提取物对BS复发率及产色菌和致龋菌影响的研究仍不足，因此研究人员开展随机对照试验（randomized controlled trial, RCT），比较草本牙膏与含氟牙膏对BS复发率、染色评分和家长满意度的影响，并量化唾液SM、LB、内氏放线菌（Actinomyces naeslundii, AC）和PM。研究人员将28名6–12岁BS儿童随机分入含氟牙膏（Signal Cavity Fighter
?）对照组和草本牙膏（Dabur Red
?）实验组，随访6个月。结论显示，草本牙膏在降低染色复发、提高家长满意度及减少除SM外纳入细菌方面具有前景，含氟牙膏对SM的降低更强。该研究为草本牙膏用于BS管理提供了初步临床证据，但仍需更大规模、完全盲法、多中心研究验证。
为开展研究，研究人员采用单盲RCT，遵循临床试验报告统一标准（Consolidated Standards of Reporting Trials, CONSORT）2025。样本来自埃及国家研究中心医学卓越中心牙科门诊，2024年11月至12月招募28名6–12岁BS儿童，按1:1随机分组。采用Gasparetto et al.染色指数评估BS；采集未刺激全唾液5 mL，提取DNA，以qPCR绝对定量SM、LB、AC、PM，并按基线至6个月计算细菌载量降低百分比；采用5点Likert量表评估家长满意度；统计采用卡方检验/Monte Carlo模拟、Mann–Whitney U检验、混合累积连接有序模型、Wald检验及Holm校正，使用R 4.5.2，效应量按Cohen, J.标准解释。
研究结果中，Demographic and baseline characteristics显示两组人口学和基线特征无显著差异。Stain recurrence data显示，经卡方检验/Monte Carlo模拟，草本组无染色复发比例85.7%显著高于对照组42.9%，p=0.013，ω=0.53，为大效应；两组各有2名儿童（14.29%）出现“轻微”复发。The staining score data显示，术前两组多数病例评分为2或3，差异无统计学意义；术后草本组达到评分0的比例显著高于对照组，但效应量小，ω=0.28；两组术后评分均显著降低，为中等效应；摘要报告评分0为p=0.004，ω=0.38。The data for satisfaction scores显示，草本组满意度评分为5的比例显著高于对照组，Cliff’s δ=?0.51，为大效应；摘要报告p=0.008。The data for bacterial reduction显示，SM降低幅度在对照组显著更大（87.9% vs 78.5%，p=0.014）；LB、AC和PM降低幅度在草本组显著更大，均p<0.001，Cliff’s δ接近?1.0，所有效应量均大。两组SM降低均>78%，说明两种牙膏均有一定抗SM活性，但含氟牙膏更强。No harms or unintended reactions记录显示，未观察到牙敏感、牙龈刺激或新活动性龋损等伤害或非预期反应，该记录通过月度电话问卷和6个月临床检查完成。
讨论部分认为，两组人口学无显著差异，说明结果可归因于干预而非混杂因素。选择6–12岁混合牙列阶段，是因为BS在5岁以上儿童中的患病率约为三倍。第一零假设被谨慎拒绝，但染色评分改善效应小，其临床意义不确定。草本牙膏作用可能与其成分有关：Garik powder（红赭石）为温和磨料，有助于去除附着牙石；丁香油可诱导蛋白变性、破坏细胞膜，导致胞内内容物泄漏和细胞死亡；Pippali（Piper longum）和Maricha（Piper nigrum）可改善口腔卫生、减少与染色形成相关的细菌生长，并可能通过抗炎作用减少牙龈炎症。家长满意度方面，草本组满意度为85.71%，对照组为42.86%；对照组较低可能与含氟牙膏主要预防龋病，而缺乏去除外源性染色所需磨料或化学氧化剂有关。细菌方面，含氟牙膏对SM抗菌作用更强，而草本牙膏对LB、AC和PM降低更明显。既往研究异质性可能源于方法差异，尤其是菌落形成单位计数与qPCR定量的差异，以及年龄范围不同。局限性包括：样本量相对较小，样本量计算基于Cohen’s d=1.14的大效应，可能限制检测较小或中等组间差异的统计功效，不能排除II类错误；年龄跨度较宽、随访期较短；缺乏正式检查者校准和定量检查者内部可靠性评估；儿童、家长和操作者对牙膏类型盲法不完整；单中心研究限制外推；依从性依赖儿童自我报告、月度电话随访和回收牙膏管检查，可能不能准确反映实际刷牙行为；每类仅评价一个品牌；未控制饮食和口腔卫生等因素；仅检测四种细菌；回顾性临床试验注册；LB和AC的存档校准曲线线性较低（R
2分别为0.9636和0.9740），LB检测效率为111%，因此这些目标的定量结果应谨慎解释。未来建议开展更大样本、多中心、延长随访、完全盲法、分层年龄的RCT，并进行正式检查者校准和检查者内部可靠性评估，以及更全面的微生物学调查。
研究结论翻译：在本研究的局限性内，与常规含氟牙膏相比，草本牙膏可能在去除染色方面显示出有前景的疗效，尤其是在6个月随访后的染色复发和家长满意度方面。含氟牙膏对SM的减少显著大于草本配方，而LB、AC和PM在草本组较对照组显著降低。这些发现是初步的，需要在更大规模、完全盲法、多中心的研究中重复验证（补充信息）。
