体积定量干血样本中大麻素多组分的HPLC-MS/MS定量分析

《Journal of Cannabis Research》：Non-psychotropic phytocannabinoids, Δ9-THC and their metabolites by means of volumetric dried blood microsampling

摘要

基于大麻素的制剂在临床治疗中的应用日益增长，且市面上可获得的大麻产品种类日益多样化，这使得亟需一种能够同时监测血液中多种药理学相关大麻素的分析方法。目前，尚无可用的经完全验证的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法，用于通过体积定量干血微量采样获取的血液中多组分大麻素面板的全面分析。为填补这一空白，我们报告了一种高效液相色谱-串联质谱方法开发、优化和完全验证的过程，该方法可同时对九个化合物进行定量测定，包括大麻二酚（CBD）、7-羟基大麻二酚（7-OH-CBD）、7-羧基大麻二酚（7-COOH-CBD）、6α-羟基大麻二酚（6α-OH-CBD）、大麻酚（CBN）、大麻苄基醇（CBG）、Δ9-四氢大麻酚（Δ9-THC）、11-羟基-四氢大麻酚（11-OH-THC）和11-去甲-9-羧基-四氢大麻酚（THC-COOH），所使用的血液样本是通过hemaPEN?设备采集的先进体积定量干血微量样本。色谱分离采用C8柱，配合极性切换电喷雾电离技术实现。为解决血液中各化合物浓度范围广泛的问题，引入了一种双重方案的提取策略：预期浓度较高的化合物（THC-COOH、CBD、7-OH-CBD和7-COOH-CBD）从单个hemaPEN滤纸圆片（2.74 μL；定量下限2.0–5.0 ng/mL）中定量测定，而需要更高灵敏度的Δ9-THC、11-OH-THC、6α-OH-CBD、CBN和CBG则从四片合并的滤纸圆片（10.96 μL；Δ9-THC、11-OH-THC、6α-OH-CBD、CBN和CBG的定量下限均为0.5 ng/mL）中提取。该策略充分利用了该技术独特的四重复制结构，即通过单次指端采血利用毛细管作用生成四个体积相同的干血斑点。该方法已就选择性、线性、精密度、准确度、提取回收率、基质效应、红细胞压积独立性和稳定性等方面进行了验证。提取回收率在67.8%至81.7%之间；在六个供体基质中，内标归一化后的基质效应在89.6%至98.6%之间。该化合物面板在室温下的稳定性至少可达90天。该方法已应用于真实血液样本，成功实现了对全部九种化合物的定量测定。本方法为法医和毒理学大麻素监测、接受基于大麻素治疗的患者的治疗药物监测（TDM），以及临床和临床前研究中的药代动力学表征，提供了一种经验证的、在物流上具有可行性的工具。