《Journal of Chromatography A》：Dynamic enantioselective high-performance liquid chromatography as a tool to probe configurational lability: Investigation of a chiral tetrahydrofuran building block
编辑推荐：
•一种手性四氢呋喃基半缩胺在醇溶液中表现出易变特性。•动态高效液相色谱法被用作分析工具来确定对映异构化能垒。•消旋化能垒从动态色谱数据中提取。•使用Auto-DHPLC-y2k软件进行动态色谱曲线的模拟。•酸/碱添加剂通过不同机制促进相互转化。引言药物化合物的开发越来越依赖于
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一种手性四氢呋喃基半缩胺在醇溶液中表现出易变特性。
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动态高效液相色谱法被用作分析工具来确定对映异构化能垒。
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消旋化能垒从动态色谱数据中提取。
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使用Auto-DHPLC-y2k软件进行动态色谱曲线的模拟。
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酸/碱添加剂通过不同机制促进相互转化。
引言
药物化合物的开发越来越依赖于杂环骨架。虽然平面杂芳环传统上用于调节理化性质，但饱和杂环通过引入立体中心提供了增加分子复杂性的更大潜力。其三维架构已被证明能增强药效动力学和药代动力学性质[1,2]。
在此背景下，饱和杂环的直接C–H官能化已成为从简单前体获取复杂生物活性分子的强大且经济有效的策略。在这些转化中，C–N键的形成尤为重要，因为氮在精细化学品和活性药物成分中普遍存在[[3], [4], [5]]。
该领域的一项重大进展是环醚与含氮亲核试剂的α-官能化[[6], [7], [8], [9], [10], [11]]。该方法也在电化学条件下被探索作为经典C(sp3)–H胺化的替代方案[[12], [13], [14]]。鉴于我们近期对电合成方面的研究兴趣[[15], [16], [17]]，我们利用镍催化电化学条件合成了手性四氢呋喃衍生物1（图1），作为制备天然产物类似化合物（包括Tegafur和9-THF-Ade）的有价值合成子，二者均已知具有生物活性[18]。
在将化合物1的对映异构体用于不对称合成之前，有必要评估其在转化和纯化过程中通常遇到的条件下的构型稳定性。酸性、碱性或热条件引起的部分消旋化可能损害立体化学完整性，最终降低多步工艺中的对映纯度。在此背景下，能够直接探测立体化学易变性的分析方法至关重要。其中，动态高效液相色谱（DHPLC）是一种尤为强大的方法，因为它能实时观察柱上互变过程，并提供控制对映异构化的动力学和热力学参数[19]。
在本研究中，我们通过结合动态色谱与互补的柱外技术整合方法，对手性半缩胺1的构型稳定性进行了研究。通过温度控制的条件下在多糖基手性固定相上使用DHPLC监测柱上对映异构化过程，直接观察分离过程中的互变现象。与此同时，通过将富集对映体的化合物1样品暴露于酸性和碱性条件进行柱外消旋化实验，随后通过手性HPLC分析监测对映过量的时间演变。此外，溶液态核磁共振（NMR）光谱为消旋化途径中涉及的物种提供了结构信息。这种综合策略为在合成和色谱分析相关条件下全面了解该半缩胺体系的构型行为提供了保障。
章节摘要
化学药品和试剂
所有可用的化学品和溶剂均购自商业来源，未经进一步纯化即使用。快速柱色谱（FCC）纯化使用硅胶Si 60，230-240目，0.040-0.063 mm（Merck KGaA，Darmstadt，德国）进行。1H和13C NMR光谱在Bruker Avance 400上记录（分别为400和101 MHz）；化学位移以百万分之一下行表示，相对于SiMe?，使用残留质子（CHCl? = 7.26 ppm）和碳
立体化学稳定性研究
使用Chiralpak AD-3手性固定相（CSP）通过HPLC研究化合物1的对映异构分离。这种基于多糖的材料由涂覆在3 μm硅胶颗粒上的直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)组成，已表明在正相和反相条件下均具有广泛的对映选择性[40]。
以正己烷/乙醇 60:40 (v/v) 为流动相，柱温设定为10°C，色谱分析得到五
结论
柱上对映异构化现象及相关色谱基线畸变已被认识并进行了数十年的广泛研究。本工作的新颖性不在于这些现象本身的观察，而在于将其应用于阐明结构复杂且高度易变四氢呋喃基半缩胺的构型稳定性。在此背景下，动态HPLC被证明是获取
CRediT作者贡献声明
Camilla Loro：调查、数据整理、写作 – 审阅与编辑。Giuseppe Gattuso：调查、数据整理。Davide Spanu：数据整理。Marco Pierini：计算、软件、数据整理、写作 – 审阅与编辑。Roberto Cirilli：监督、调查、数据整理、写作 – 原稿撰写、写作 – 审阅与编辑。
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Camilla Loro：写作 – 审阅与编辑、调查、数据整理。Giuseppe Gattuso：写作 – 审阅与编辑、调查、数据整理。Davide Spanu：数据整理。Marco Pierini：写作 – 审阅与编辑、软件、数据整理。Roberto Cirilli：写作 – 审阅与编辑、写作 – 原稿撰写、监督、调查、数据整理、概念设计。
利益冲突声明
作者声明不存在可能影响本论文所述工作的已知竞争经济利益或个人关系。
致谢
本研究由Insubria大学和Insubria大学CRIETT中心（仪器编号：MAC01，MAC15）资助，在此表示感谢。
Camilla Loro|Giuseppe Gattuso|Davide Spanu|Marco Pierini|Roberto Cirilli
