可回收曲面多层角膜类器官芯片模型的构建及其神经整合表征

《Biomedicines》：A Recoverable Curved Multilayer Cornea-on-a-Chip with DRGO-Derived Neurites

**摘要****背景：**目前，将曲面几何结构、多层组织构建、神经成分、气-液界面（ALI）培养以及灌注技术相结合的体外角膜模型仍然有限。**方法：**我们开发了一种可回收的曲面多层类器官芯片角膜模型（CMCoC），采用了一种具有7.8毫米半径穹顶的两组分聚二甲基硅氧烷（PDMS）装置。该模型包含HCE-T衍生的上皮层、嵌入可塑性压缩I型胶原蛋白中的人角膜基质细胞、含有HCEC-B4G12的角膜内皮区室，以及沿周向分布的由人诱导多能干细胞衍生自的背根神经节类器官（DRGOs）。组装完成后，模型进行了7天的灌注以允许外周神经突延伸，随后进行上皮播种并继续进行14天的ALI培养及基底面灌注。**结果：**回收的组织显示出可见的曲面轮廓。免疫荧光检测证实了预期的上皮-基质-内皮组织排列、多层上皮结构，以及广泛的与上皮区室相关联的βIII-微管蛋白阳性DRGO来源神经突。与小鼠角膜对照相比，CMCoC的上皮区室较薄，且βIII-微管蛋白阳性面积比例更高。其余三项神经形态学比较在统计调整后无显著差异。**结论：**CMCoC整合了可回收的曲面组织结构、多细胞组织排列以及DRGO来源的神经突，为未来研究角膜组织间的相互作用提供了基础。