《MedComm》：Integrative Multiomics Profiling Reveals Immune Determinants of Response to Disitamab Vedotin Plus Penpulimab in HER2-Low Breast Cancer
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中文翻译摘要
这项前瞻性单臂研究评估了维迪西妥单抗（disitamab vedotin）联合派安普利单抗（penpulimab）在Ⅱ-Ⅲ期HER2低表达乳腺癌（HER2-low breast cancer，免疫组织化学1+或2+，荧光原位杂交阴性）患者中的新辅
中文翻译摘要
这项前瞻性单臂研究评估了维迪西妥单抗（disitamab vedotin）联合派安普利单抗（penpulimab）在Ⅱ-Ⅲ期HER2低表达乳腺癌（HER2-low breast cancer，免疫组织化学1+或2+，荧光原位杂交阴性）患者中的新辅助治疗效果，该人群缺乏针对性的新辅助治疗选择。20例患者在接受手术前接受了每3周一次、共6个周期的联合治疗。在意向治疗人群中，病理学完全缓解（pCR）率为20.0%（4/20；95% CI，5.7–43.7%），客观缓解率（ORR）为45.0%（9/20；95% CI，23.1–68.5%）。在完成方案规定治疗和手术的16例患者中，pCR率为25.0%（4/16；95% CI，7.3–52.4%），ORR为56.3%（9/16；95% CI，29.9–80.2%），31.3%的患者达到残余肿瘤负荷（residual cancer burden，RCB）0-1级。≥3级不良事件发生率为25.0%；无治疗相关死亡发生。与pCR相关的肿瘤在治疗前呈现免疫活性微环境，富含炎症蛋白、转录本和肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes，TILs），而无应答者则表现出更高的M2/M1巨噬细胞比值。一项结合CCL19和M2/M1比值的探索性基线评分显示出pCR/非pCR分离（AUC = 0.8889），但在内部验证中效能下降（留一法交叉验证AUC = 0.6667，乐观校正自助法AUC = 0.8375）。该联合疗法显示出初步的抗肿瘤活性和可控的安全性；然而，鉴于样本量较小且置信区间较宽，这些发现无法得出关于疗效的确定性结论，需要在更大规模的随机对照试验中进行验证。
论文解读文章
研究背景
人类表皮生长因子受体2（HER2）阳性乳腺癌侵袭性强、对化疗敏感性低且预后差，而靶向药物的开发已显著改善了该亚型的治疗结局。然而，超过一半的HER2阴性转移性乳腺癌实际上表现为HER2低表达，定义为免疫组织化学（IHC）1+或IHC 2+且原位杂交（ISH）阴性。对于激素受体（HR）阳性的HER2低表达乳腺癌，目前的新辅助治疗方案包括蒽环类-紫杉烷化疗或内分泌治疗，但病理学完全缓解（pCR）率仍低于10%。对于三阴性乳腺癌（TNBC）亚型，虽然KEYNOTE-522和IMpassion031等研究表明加入免疫检查点抑制剂可显著提高pCR率，但在中国，帕博利珠单抗在新辅助治疗中的获批仅限于高风险早期TNBC且肿瘤程序性死亡配体1（PD-L1）联合阳性评分（CPS）≥20的患者。因此，针对更广泛的HER2低表达人群，仍然存在有效且耐受性良好的新辅助治疗方案的未满足临床需求。抗体药物偶联物（ADC）如维迪西妥单抗（RC48）已在HER2低表达乳腺癌中展现出令人鼓舞的临床结果，其携带的微管抑制剂单甲基奥瑞他汀E（MMAE）可通过旁观者效应杀伤邻近肿瘤细胞。同时，派安普利单抗是一种经Fc段改造的新型人源化抗程序性死亡1（PD-1）IgG1单克隆抗体，可消除抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）/抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP）/补体依赖的细胞毒作用（CDC）效应以避免效应T细胞耗竭。基于ADC可诱导免疫原性细胞死亡从而将“冷”肿瘤微环境重塑为对PD-1/PD-L1阻断更敏感的“热”微环境的理论基础，研究人员开展了这项探索性临床研究，旨在评估RC48联合派安普利单抗在HER2低表达早期或局部晚期乳腺癌中的疗效和安全性，并通过整合多组学分析探索应答的生物标志物。该论文发表于《MedComm》。
主要技术方法
该研究是一项单臂、单中心探索性临床试验（ClinicalTrials.gov标识符：NCT05726175），于华西医院开展。主要关键技术方法包括：（1）采用Olink Target 96炎症 panel进行血浆蛋白质组学定量分析；（2）利用多重免疫荧光（mIF）技术对福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片进行空间免疫细胞表型分析；（3）通过批量RNA测序（RNA-seq）获取转录组数据，并使用DESeq2进行差异基因表达分析，xCell算法进行免疫细胞浸润推断；（4）基于公开单细胞RNA测序数据集GSE176078进行候选蛋白的细胞来源注释；（5）采用逻辑回归构建探索性基线应答预测评分（BRPscore），并通过留一法交叉验证（LOOCV）和自助法（bootstrap）进行内部验证。
研究结果
2.1 患者入组与基线特征
从2023年8月14日至2024年8月7日，共筛选50例患者，其中20例符合条件并开始新辅助治疗，构成意向治疗（ITT）和安全人群。16例患者（80%）完成了所有计划的新辅助周期并接受了手术。基线特征显示，中位年龄43.5岁，所有患者均为女性且美国东部肿瘤协作组体能状态评分为0。半数肿瘤为HER2 IHC 1+，半数IHC 2+/FISH?。大多数患者为高增殖性疾病（Ki-67>20%占80%），HR阳性常见（雌激素受体阳性90%，孕激素受体阳性85%），多数为T2期（65%）和淋巴结阳性（85%），65%为Ⅱ期，35%为Ⅲ期。PD-L1 CPS≥1的患者占55%。
2.2 疗效与安全性
在ITT人群中，pCR率为20.0%（4/20；95% CI 5.7–43.7%），客观缓解率（ORR）为45.0%（9/20；95% CI 23.1–68.5%）。在符合方案（PP）人群中，pCR率为25.0%（4/16；95% CI 7.3–52.4%），ORR为56.3%（9/16；95% CI 29.9–80.2%）。手术时，31.25%的患者达到残余肿瘤负荷（RCB）0-1级，68.75%为RCB-3级。安全性方面，所有患者均发生至少一次治疗期间出现的不良事件（TEAE），25.0%发生≥3级TEAE，无治疗相关死亡。常见的ADC相关不良事件包括脱发（90%）、感觉异常（40%）、失眠（25%）。免疫相关不良事件包括甲状腺功能减退（20%）、甲状腺功能亢进（15%）、免疫介导的心肌炎（5%）。
2.3 基线因素与病理学应答的相关性
通过Olink蛋白质组学分析，研究人员发现pCR组有7种蛋白（IL13、CSF-1、uPA、TNFRSF9、β-NGF、CCL19和CCL11）显著上调，京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析显示这些蛋白富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用、IL-17信号通路、NF-κB信号通路和趋化因子信号通路。RNA测序结果显示pCR组多个关键免疫相关基因显著上调，包括T细胞受体相关基因、B细胞受体相关基因和免疫调节基因。多重免疫荧光结合泛角蛋白肿瘤/基质分割分析显示，非pCR组的M2巨噬细胞浸润水平和M2/M1巨噬细胞比值更高，而pCR组含有更多的肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）。
2.4 探索性基线生物标志物评分的开发与内部评估
通过整合蛋白质组、免疫细胞和转录组特征，研究人员构建了一个包含CCL19和M2/M1巨噬细胞比值的两变量逻辑回归模型——基线应答预测评分（BRPscore）。该评分的表观受试者工作特征曲线下面积（AUC）为0.8889，但留一法交叉验证后AUC降至0.6667，乐观校正自助法AUC为0.8375。作为基准比较，常用的PD-L1阈值（1和10）显示出有限的区分能力。
2.5 快速期分子动态变化
在第3周期第1天（C3D1）与基线的蛋白质组比较中，pCR组有10种蛋白增加、2种减少，非pCR组有33种蛋白增加。韦恩分析识别出13种潜在特征蛋白，包括pCR组特有的5种蛋白（IL-22RA1、4E-BP1、CD6、MCP-1和MCP-3）以及非pCR组特有的7种在pCR组呈相反趋势的蛋白。RNA-seq分析进一步揭示了免疫相关通路的差异激活。xCell反卷积分析突出了B细胞区室作为主要的治疗中信号，非pCR组的总B细胞在C3D1显著减少。
2.6 纵向蛋白质组学程序与候选生物标志物
时间序列分析识别出13种在治疗过程中持续升高的蛋白。重复测量方差分析与STEM建模的整合确定了11种具有阶段依赖性变化的蛋白，包括CCL3、CCL4、CD40、HGF、IL-12B、IL-15RA、IL-18R1、IL8、MCP-1、TNFB和TNFRSF9。在治疗后阶段，pCR肿瘤中有7种蛋白水平高于非pCR肿瘤。三重韦恩分析确定MCP-1是唯一在快速反应期、全程反应和治疗后结局三个组间共享的蛋白。蛋白-蛋白互作网络分析显示MCP-1处于高度连接的位置，在趋化因子招募和共刺激/细胞因子信号传导之间发挥桥梁作用。
讨论与结论总结
讨论部分指出，这是一项单臂、单中心探索性试验，由于缺乏随机化和同期对照组，无法将观察到的pCR和ORR因果归因于研究方案。与其他外部试验的跨试验比较受到患者选择、HR状态组成、HER2定义、化疗方案和pCR定义异质性的混淆。样本量有限导致统计效力不足，亚组分析仅为探索性，长期终点尚未成熟。BRPscore和动态MCP-1信号来自同一队列的小型生物标志物子集，其报告的性能可能存在乐观偏倚。
结论部分翻译如下：总之，这项探索性研究提供了初步的临床和转化证据，支持进一步研究新辅助维迪西妥单抗联合派安普利单抗在HER2低表达早期乳腺癌中的应用。探索性分析识别出CCL19、M2/M1巨噬细胞比值和MCP-1作为应答的候选生物标志物；然而，BRPscore源自非常小的子集并显示出潜在的过拟合（乐观偏倚）。因此，这些生物标志物发现应仅被视为假设生成性的。它们需要在更大规模的独立随机对照试验中进行验证后才能应用于临床。
