山羊奶寡肽在幼龄肠道中对人乳跨上皮转运效率及机制特征的模拟

《International Dairy Journal》：Goat milk oligopeptides mimic human milk in transepithelial transport efficiency and mechanistic signatures in the juvenile intestine

　　摘要- 羊乳寡肽的肠道吸收特征与乳人乳寡肽相匹配。- 可吸收的羊乳寡肽多为短肽，且具有亲水性强和脯氨酸富集的特点。- 肽转运体PHT1/2主导羊乳寡肽的转运吸收。- 羊乳寡肽可上调肠道PEPT1、PHT2及NHE3的表达。**引言**膳食蛋白质的生物利用率不仅取决于其氨基酸组成，还受胃肠道中肽生成与吸收动力学的影响（Yang等，2026）。消化过程中生成的生物活性肽发挥多种生理功能，且其释放量在生命早期尤为显著，此时胃肠道蛋白酶活性相对较低（Beverly等，2021）。与成熟消化系统不同，婴幼儿不成熟的肠道促进的是部分水解而非完全水解，使得具有生物活性的寡肽作为中间消化产物在肠腔内积累（Bourlieu等，2014）。这种不完全消化从某种意义上说恰恰为保留生物活性肽提供了重要的生理基础。此外，无论是动物灌胃研究还是口服乳蛋白后的体外肽组学分析，均证实了血液中存在来源乳源性的生物活性寡肽（Biondi Ryan等，2025；Caira等，2022）。这些检测结果为其吸收及随后潜在的生物活性提供了直接证据，尤其是在生命早期阶段。作为婴幼儿关键营养来源，乳蛋白消化后释放寡肽，而这些蛋白来源肽的高效吸收对于支持快速生长、免疫成熟和肠道屏障发育至关重要（Hu等，2024；Wada & L?nnerdal，2020）。虽然人乳被视为婴幼儿营养的金标准，但其有限供应量要求开发替代乳源。其中，羊乳因其相较牛乳具有更高的消化率和更低的致敏性而日益受到关注（Duan等，2021）。我们之前的研究也表明，羊乳蛋白可能比牛乳蛋白产生更多生物活性肽，且其肽谱与人类乳蛋白更为接近（Zhang等，2025）。然而，这三种乳源之间肽吸收效率的定量比较及其潜在的转运机制仍缺乏系统研究。既往研究已确立，小分子寡肽（二肽至三肽）是小肠内饮食氮的主要可吸收形式，通过专门结合质子耦合的寡肽转运体跨越肠上皮细胞刷状缘膜，主要包括PEPT1及肽/组氨酸转运体PHT1/2（Smith等，2013）。这些质子依赖性转运体的活性与顶端钠/氢交换体（NHEs）在功能上耦合，后者产生的向内质子梯度推动肽的吸收，同时通过电中性Na?/H?交换维持细胞内pH稳态（Yeo等，2023）。值得注意的是，新近证据表明，肽的吸收可能涉及非经典途径，包括跨细胞转运和旁细胞渗透，尤其是在特定氨基酸序列基序有助于膜相互作用时（Hevia等，2023；Yu等，2024）。尽管已有这些进展，但关于羊乳来源肽与牛乳和人乳来源肽相比在吸收动力学和转运途径上是否存在差异的比较研究仍十分匮乏。赋予不同吸收效率的分子特征，如肽大小分布、亲水性模式和氨基酸组成，在这三种乳源之间的评估尚未开展。因此，本研究旨在比较羊乳、牛乳和人乳来源寡肽的吸收动力学及转运机制。我们采用动态体外婴幼儿胃肠消化模型，模拟新生儿消化条件产生具有生理相关性的寡肽组分。随后利用新鲜离体幼鼠空肠组织Ussing培养皿检测上皮通透性及底层的渗透途径，该模型旨在模拟生命早期的肠道生理特征。寡肽与肽转运体的结合亲和力通过针对PEPT1和PHT2的分子对接分析进行探索，以阐明载体介导识别的结构决定因素。此外，在幼年小鼠模型中进行活体实验，监测肠腔内源性寡肽的产生，并评估关键膜转运体（包括PEPT1、PHT1/2和NHEs）在近端和远端小肠的区域性调控效应。**章节摘要****2.1 乳样收集**人乳样本由澳优乳业股份有限公司提供，该样本由产后42天内健康哺乳期女性捐赠者提供，具体细节详见我们之前的研究（Zhu等，2024）。该研究已获中南大学湘雅公共卫生学院医学伦理委员会批准（批准号：XYGW-2020-37）。新鲜牛乳和羊乳分别购自内蒙古呼伦贝尔和山东烟台的商业农场。所有乳样**3.1 体外吸收效率及乳源寡肽的肽组学表征**基底层组分的UPLC色谱图显示，三种乳源均在约10–13分钟处出现特征性寡肽峰（图1A）。值得注意的是，羊乳寡肽（GMP）和人乳寡肽（HMP）的峰强度明显高于牛乳寡肽（CMP），表明其上皮通透效率更高。峰面积定量分析进一步证实，GMP和HMP的累积转运量均显著高于CMP（*P* < 0.05），两者之间无显著差异**4. 讨论**乳源寡肽独特的氨基酸组成是其吸收效率和功能特性的关键决定因素（Li等，2026）。本研究揭示了羊乳蛋白消化后产生的可吸收寡肽主要为含有少于10个氨基酸残基的低分子量肽，其中脯氨酸、缬氨酸和谷氨酰胺富集，这一组成模式与人乳寡肽高度一致**5. 结论**本研究探讨了人乳、羊乳和牛乳来源寡肽在肠道吸收方面的差异及其潜在分子机制。结果显示，羊乳寡肽的吸收效率显著高于牛乳寡肽，且与人乳寡肽相似。这种增强的吸收与其短肽比例较高及亲水性较强有关。在机制上，羊乳**CRediT作者贡献声明****邹雅伦：** 论文撰写——初稿、可视化、方法论、调查研究、数据整理。**赵才栋：** 论文撰写——初稿、方法论、调查研究、形式分析、数据整理。**邓泽远：** 论文撰写——审校与编辑、可视化、监督、资源、形式分析。**彭晓宇：** 可视化、验证、项目管理、形式分析。**李伟：** 可视化、资源、项目管理。**高原：** 可视化、资源、项目管理。**肖虹：****伦理声明**所有参与者或其法定代理人均已签署书面知情同意书，同意参与本研究及发表文章。参与者的隐私权已得到尊重。本研究是在研究所在地遵守相关法律、监管框架和指南的前提下进行的。本研究符合中南大学湘雅公共卫生学院医学伦理委员会的要求。本研究已获该委员会批准**利益冲突声明**作者声明不存在已知的经济利益冲突或个人关系可能影响本文报告工作的情况。**致谢**本项目由国家自然科学基金（基金号：32402081）、赣鄱人才支持计划——江西省重大学术和技术带头人培养项目（基金号：20243BCE51070）、江西省自然科学基金（基金号：20252BAC240697）以及湖南省营养健康产品工程技术研究中心创新平台与人才计划（基金号：2019TP2066）资助。邹雅伦｜赵才栋｜邓泽远｜彭晓宇｜李伟｜高原｜肖虹｜郑刘锋