2021年6月,在土耳其南部Batman省(37°33’20.00”N,41°09’43.34”E)的五个果园中,共有60棵开心果树,其中14棵(占23.3%)出现了干枯病和衰退症状。受感染的植株呈现出棕色、不规则的溃疡,导致新枝死亡和叶片脱落,同时伴有小的黄化病斑及萎蔫现象。14个表现出症状的枝条和茎样本先用2%的NaOCl进行表面消毒2分钟,随后置于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上,25°C条件下培养七天以确定病原体。从30个分离样本中获得了真菌菌落,所有菌落形态相似。进一步培育得到纯培养物。这些菌落呈白色至奶油色,表面光滑,产生的分生孢子为单细胞、透明、丝状,略弯曲,大小为(19.2–27.6)×(1.0–1.5)微米(平均23.9±3.0×1.2±0.1微米)。通过对代表性菌株BG2-G的internal transcribed spacer(ITS4/ITS5)和β-tubulin(Bt2a/Bt2b)基因进行测序(参考文献:Glass和Donaldson 1995),完成了分子鉴定,并将其序列存储在GenBank数据库中(ITS: OM416249;TUB2: OM468562)。BLASTn分析显示,该病原体与Cryptovalsa ampelina菌株Cval-01的参考序列(ITS: MG745830;TUB2: MG745797)的相似度达99–100%。通过串联序列的系统发育分析证实其属于Cryptovalsa ampelina(Nitschke)(参考文献:Trouillas等人 2011)。为了测试其致病性,将7天龄培养物中的5毫米菌丝块接种到二年生开心果幼苗茎部的伤口上(伤口深度为2毫米,使用软木钻制成)。接种部位用封口膜包裹并置于30°C的温室环境中。实验重复进行了三次。在接种BG2-G的12株植物中,有6株在三个月内出现了长10–13毫米的溃疡病斑;而对照组则未出现任何症状。从有症状的组织中成功重新分离出了C. ampelina,这符合科赫法则。据我们所知,这是首次有报道显示Cryptovalsa ampelina在土耳其开心果树上引发干枯病的病例。