BE-PLUS-iSTOP：一种无DSB胞嘧啶碱基编辑策略精准灭活HPV18 E6/E7用于宫颈癌病因导向治疗

《Molecular Therapy》：Base editing-mediated induction of stop codons in HPV18 E6/E7 for cervical cancer therapy

　　<摘要>高危型人乳头瘤病毒（hrHPVs）的持续感染是宫颈癌发生的主要驱动因素，其中病毒癌基因E6和E7起着关键作用。传统的基于核酸酶的基因编辑策略受限于全基因组范围的脱靶效应以及与双链断裂（DSBs）相关的基因组扰动。为解决上述挑战，我们开发了BE-PLUS-iSTOP，一种无双链断裂的胞嘧啶碱基编辑策略，旨在通过精确插入提前终止密码子（PTCs）来灭活HPV18 E6/E7。该策略实现了高效的靶向编辑效率（E6为51.00 ± 2.94%，E7为26.33 ± 2.62%），且插入/缺失（indel）形成极少（E6不可检测，E7 < 0.1%）。功能分析表明，BE-PLUS-iSTOP可有效降低E6/E7蛋白表达，从而显著抑制HPV18阳性宫颈癌细胞的恶性表型。在皮下异种移植小鼠模型中，瘤内递送BE-PLUS-iSTOP诱发了广泛的肿瘤坏死并显著抑制了肿瘤生长，在测试条件下未见明显的全身毒性。综上所述，这些发现确立了BE-PLUS-iSTOP作为HPV18阳性宫颈癌精准高效病因导向治疗策略的地位，支持其进一步转化开发的潜力，并拓宽了抗病毒基因治疗的范畴。康月|吴一帆|鲍碧婷|王雪倩|俞志强|曹晨|王智|王昭杰|陈刚|马钉|易涛|胡正|田勋