双重巢式液滴数字PCR同时检测牛病毒性腹泻病毒与蓝舌病病毒方法的建立与应用

《BMC Veterinary Research》：Development of a double-nest droplet digital PCR technology for detection of BVDV and BTV

【字体：大中小】 时间：2026年10月08日 来源：BMC Veterinary Research 3.1

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　　摘要背景牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和蓝舌病病毒(BTV)是影响反刍动物的重要病原体，两者宿主范围重叠，在混合饲养或共同放牧的动物中容易引发混合感染。这一直是畜牧业领域备受关注的问题，给全球畜牧业造成了巨大的经济损失。因此，建立一种高灵敏度和特异性的检测方法来同时检测BVDV

摘要

背景

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和蓝舌病病毒(BTV)是影响反刍动物的重要病原体，两者宿主范围重叠，在混合饲养或共同放牧的动物中容易引发混合感染。这一直是畜牧业领域备受关注的问题，给全球畜牧业造成了巨大的经济损失。因此，建立一种高灵敏度和特异性的检测方法来同时检测BVDV和BTV至关重要。本研究通过优化反应体系和液滴生成条件，基于BVDV NS3基因和BTV VP7基因的保守区域建立了一种双重巢式液滴数字PCR(ddPCR)检测方法。

结果

双重巢式ddPCR结果显示，该方法具有高敏感性，BVDV和BTV的最低检测限分别为4.8 × 10^?3 copies/μL和4.7 × 10^?2 copies/μL。同时，该方法对低浓度的BVDV和BTV样品具有稳定的重复性，批内和批间变异系数均小于20%。此外，该方法特异性高，与其他重要反刍动物病原体无交叉反应。检测了32份公羊精液样品，结果显示BVDV和BTV的阳性率均为6.25%(2/32)。

结论

双重巢式ddPCR方法具有高灵敏度和特异性，能够对两种病毒同时进行精确定量检测。该方法可为临床诊断和流行病学调查提供可靠的技术支持。

背景

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和蓝舌病病毒(BTV)是影响反刍动物的重要病原体，两者宿主范围重叠，在混合饲养或共同放牧的动物中容易引发混合感染。这一直是畜牧业领域备受关注的问题，给全球畜牧业造成了巨大的经济损失。因此，建立一种高灵敏度和特异性的检测方法来同时检测BVDV和BTV至关重要。本研究通过优化反应体系和液滴生成条件，基于BVDV NS3基因和BTV VP7基因的保守区域建立了一种双重巢式液滴数字PCR(ddPCR)检测方法。

结果

双重巢式ddPCR结果显示，该方法具有高敏感性，BVDV和BTV的最低检测限分别为4.8 × 10^?3 copies/μL和4.7 × 10^?2 copies/μL。同时，该方法对低浓度的BVDV和BTV样品具有稳定的重复性，批内和批间变异系数均小于20%。此外，该方法特异性高，与其他重要反刍动物病原体无交叉反应。检测了32份公羊精液样品，结果显示BVDV和BTV的阳性率均为6.25%(2/32)。