游离脂肪酸诱导的脂肪变通过TNF-α/TNFR1-Caspase-2凋亡信号通路抑制HBV复制

《Virology Journal》：TNFR1–Caspase?2 apoptotic signaling is associated with reduced HBV replication markers during free fatty acid exposure in vitro

摘要

背景

慢性乙型肝炎（CHB）与代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）共存的现象日益普遍。临床与实验证据提示，肝脂肪变与乙型肝炎病毒（HBV）复制之间存在负相关关系；然而，其潜在的分子机制仍不明确。本研究旨在探讨游离脂肪酸诱导的脂肪变对HBV复制及其相关凋亡信号通路的影响，并在体外进行验证。

方法

采用稳定产生HBV的肝细胞系HepG2.2.15，以油酸钠与棕榈酸钠按2:1比例组成的游离脂肪酸（FFA）混合物处理以诱导脂肪变。通过细胞内甘油三酯含量测定及油红O染色确认脂质蓄积。采用流式细胞术评估凋亡情况。分析FFA处理前后肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）、Caspase?2、Caspase?8及HBV DNA的表达水平。通过TNF-α中和及Caspase?2药理学抑制，评估内源性TNF-α信号及Caspase?2酶活性的贡献。

结果

FFA处理在HepG2.2.15细胞中诱导了脂质蓄积，并伴随凋亡轻度增加。经FFA处理的细胞表现出TNF-α分泌升高，以及TNFR1、Caspase?8和Caspase?2表达上调，同时HBV DNA、pgRNA、HBsAg和HBeAg水平降低。TNF-α中和可部分恢复HBV复制标志物，并减弱TNFR1–Caspase?8/Caspase?2信号。以Z-VDVAD-FMK药理学抑制Caspase?2活性可降低Caspase?2酶活性，并部分逆转FFA诱导的HBV复制标志物降低。

结论

在HepG2.2.15细胞中，游离脂肪酸诱导的脂肪变伴随TNF-α/TNFR1/Caspase?8/Caspase?2信号的激活及HBV复制标志物的降低。TNF-α中和和Caspase?2抑制可部分逆转这些效应，提示在脂毒性应激期间，TNF-α/TNFR1–Caspase?2信号对HBV复制标志物的降低有所贡献，但可能并非其全部机制。