超高效液相色谱-串联质谱法测定氯硝西泮盐酸盐胶囊制剂中痕量氯硝西泮亚硝胺的方法开发与验证

《Journal of Pharmaceutical Innovation》：Development and Validation of a UHPLC–MS/MS Method for Trace-Level Determination of N-Nitroso Chlordiazepoxide in Chlordiazepoxide Hydrochloride Capsule Dosage Form

【字体：大中小】 时间：2026年10月10日 来源：Journal of Pharmaceutical Innovation 2.6

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　　摘要背景亚硝胺杂质是重要的药物质量问题，因为它们具有潜在的致突变和致癌作用。需要灵敏和可靠的分析方法来确定其在药物制剂中的含量。目的本研究旨在开发和验证一种灵敏、选择性的超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）方法，用于在盐酸氯氮草胶囊制剂中痕量测定N-亚硝基氯氮草

摘要

背景

亚硝胺杂质是重要的药物质量问题，因为它们具有潜在的致突变和致癌作用。需要灵敏和可靠的分析方法来确定其在药物制剂中的含量。

目的

本研究旨在开发和验证一种灵敏、选择性的超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）方法，用于在盐酸氯氮草胶囊制剂中痕量测定N-亚硝基氯氮草（NNC）。

方法

使用X-Select HSS C18 XP色谱柱（150 × 4.6 mm，3.5 μm）进行梯度洗脱实现色谱分离。检测采用三重四极杆质谱仪，以正电喷雾电离模式进行多反应监测（MRM），m/z 329.10 → 282.10。按照ICH Q2(R2)建议，对该方法的特异性、线性、灵敏度、精密度、准确度、溶液稳定性和滤膜相容性进行了验证。

结果

该方法证明空白、安慰剂或制剂基质成分没有干扰。在0.1732-0.6929 ppm浓度范围内建立了线性，决定系数（R2）为1.000。检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.052 ppm和0.1732 ppm。方法精密度和中间精密度%RSD值分别为14.1%和1.2%，累计%RSD为10.4%。准确度研究显示，在LOQ、100%和200%浓度水平下平均回收率为85-86%，%RSD值为0.7-1.1%。标准液和样品液在冷藏条件下分别稳定13小时和2小时。对商品10 mg和25 mg胶囊样品的分析显示，在所测试的所有批次中均未检测到NNC。

结论

所开发的UHPLC-MS/MS方法在盐酸氯氮草胶囊制剂中痕量NNC测定方面表现出灵敏性和特异性。虽然该方法显示出良好的中间精密度和一致的回收率，但在解释定量结果时应考虑观察到的方法精密度变异和潜在的低回收率。该方法成功应用于所测试的商品胶囊批次，在所采用的分析条件下未检测到NNC。

图形摘要

背景

亚硝胺杂质是重要的药物质量问题，因为它们具有潜在的致突变和致癌作用。需要灵敏和可靠的分析方法来确定其在药物制剂中的含量。

目的

本研究旨在开发和验证一种灵敏、选择性的超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）方法，用于在盐酸氯氮草胶囊制剂中痕量测定N-亚硝基氯氮草（NNC）。

方法

使用X-Select HSS C18 XP色谱柱（150 × 4.6 mm，3.5 μm）进行梯度洗脱实现色谱分离。检测采用三重四极杆质谱仪，以正电喷雾电离模式进行多反应监测（MRM），m/z 329.10 → 282.10。按照ICH Q2(R2)建议，对该方法的特异性、线性、灵敏度、精密度、准确度、溶液稳定性和滤膜相容性进行了验证。

结果

该方法证明空白、安慰剂或制剂基质成分没有干扰。在0.1732-0.6929 ppm浓度范围内建立了线性，决定系数（R2）为1.000。检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.052 ppm和0.1732 ppm。方法精密度和中间精密度%RSD值分别为14.1%和1.2%，累计%RSD为10.4%。准确度研究显示，在LOQ、100%和200%浓度水平下平均回收率为85-86%，%RSD值为0.7-1.1%。标准液和样品液在冷藏条件下分别稳定13小时和2小时。对商品10 mg和25 mg胶囊样品的分析显示，在所测试的所有批次中均未检测到NNC。