输卵管功能建模方法及其对胚胎发育的影响

《Biology of Reproduction》：Method for modeling oviduct function and impact on embryonic development

摘要

直接对哺乳动物输卵管进行实验分析的局限性在于组织获取困难以及离体制备物寿命短暂。嵌入细胞外基质的三维上皮类器官可提供更长寿命的体外模型。然而，其面向内部的顶端表面以及缺乏支持性基质细胞的限制，妨碍了对输卵管生理学研究，包括纤毛活动和母-胎交互作用。在此，我们提供了一种逐步方案，详细说明了小鼠和人类输卵管组装体的构建方法，其中上皮细胞在基质核心周围形成朝外（顶端朝外）的层。从成年小鼠输卵管或人类输卵管中分离上皮细胞和基质细胞，分别扩增，随后在旋转培养系统中聚集。该方案还概述了用于确认细胞组织的形态学和免疫染色标准、整体检测外部纤毛、测量纤毛摆动频率，以及小鼠组装体与着床前胚胎共培养的方法。小鼠和人类组装体保留了上皮和基质身份，并在可及的外表面显示纤毛。在一项概念验证实验中，与组装体共培养的胚胎发育至囊胚的比例与体内来源的囊胚相当。这一简约系统为研究输卵管生理学和胚胎-母体通讯提供了一种直接且可行的模型，同时允许对上皮界面进行直接操作和观察。

图形摘要

在新标签页中打开下载幻灯片