尿路致病特异性蛋白单克隆抗体的开发及其ELISA检测方法建立

《Applied Microbiology and Biotechnology》：Antibody-based detection of the bacterial nuclease toxin uropathogenic specific protein (USP)

【字体：大中小】 时间：2026年10月11日 来源：Applied Microbiology and Biotechnology 4.7

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　　摘要尿路致病特异性蛋白（USP）是一种与尿路感染和基因毒性相关的细菌核酸酶。尽管已在人类样本中检测到usp基因，但其编码蛋白的检测一直困难重重。在此，我们报道了一种基于抗体的检测方法，用于检测生物样本中的USP蛋白。利用生物层干涉技术，我们评估了38株含有USP特异性抗体的小

摘要

尿路致病特异性蛋白（USP）是一种与尿路感染和基因毒性相关的细菌核酸酶。尽管已在人类样本中检测到usp基因，但其编码蛋白的检测一直困难重重。在此，我们报道了一种基于抗体的检测方法，用于检测生物样本中的USP蛋白。利用生物层干涉技术，我们评估了38株含有USP特异性抗体的小鼠杂交瘤细胞。最终获得的纯化抗体（mAb-A10和mAb-D5）是首批能够特异性识别USP的单克隆抗体。我们利用这些抗体开发了一种单抗体酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，测定范围为0.1至0.12.5 μg/ml，定量下限（LOQ）为0.13 μg/ml，检测下限（LOD）为0.04 μg/ml。该方法已应用于人类尿液样本中USP的检测。两份尿液样本通过ELISA检测显示具有统计学显著的反应，尽管蛋白水平被发现低于定量下限。本方法及在此报道的抗体将极大地促进USP在临床样本中的研究和检测。