基于反向疫苗学策略的布鲁氏菌Omp28和GroEL蛋白多表位疫苗理性设计与免疫原性评价

《Scientific Reports》：Immunoinformatics design and in vitro evaluation of dendritic cell-targeting brucellosis multi-epitope vaccine based on Omp28 and GroEL

　　

摘要

布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌属细菌引起的人畜共患传染病，估计全球年发病率约为210万例。目前，尚无安全有效的人类疫苗可用。本研究利用反向疫苗学策略，筛选了源自布鲁氏菌Omp28和GroEL蛋白的16个细胞毒性T淋巴细胞表位、10个辅助性T淋巴细胞表位和3个B细胞表位。这些表位与树突状细胞靶向肽融合，设计了一种稳定、亲水、无毒且无致敏性的多表位疫苗。分子对接和动力学模拟表明，该疫苗能够与主要组织相容性复合体分子及Toll样受体4（TLR4）稳定结合。使用C-ImmSim进行的免疫模拟显示，该疫苗能够引发强烈的免疫反应。随后，构建了重组质粒pET-28a(+)-D-OG，并将其转入大肠杆菌进行诱导表达和纯化。进一步通过体外实验，包括间接酶联免疫吸附试验、细胞因子珠阵列分析和流式细胞术，验证了该疫苗的免疫原性（P?<?0.01）。本研究构建的D-OG表现出优异的结构稳定性和强免疫原性，能有效激活树突状细胞并增强抗原提呈效率，从而引发强烈的特异性免疫反应。本研究的生物信息学分析与多种体外实验共同表明，该候选疫苗具有较强的免疫原性。它对布鲁氏菌病具有可观的预防潜力，并为开发针对其他胞内细菌病原体的多表位疫苗提供了有价值的蓝图。