《Biophysical Reports》：Human salivary extracellular vesicles: a comparative study of isolation techniques
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摘要唾液是用于细胞外囊泡（EV）相关生物标志物研究的珍贵分析材料来源，但由于唾液成分复杂，分离唾液中的EV在技术上仍具有挑战性。本研究旨在通过评估获得的EV样本的质量和数量，系统地比较三种唾液EV分离方法，并重点分析这三种方法在成本、分离时间以及并行样本处理能力（即样本处理效率）
摘要
唾液是用于细胞外囊泡（EV）相关生物标志物研究的珍贵分析材料来源，但由于唾液成分复杂，分离唾液中的EV在技术上仍具有挑战性。本研究旨在通过评估获得的EV样本的质量和数量，系统地比较三种唾液EV分离方法，并重点分析这三种方法在成本、分离时间以及并行样本处理能力（即样本处理效率）方面的差异。我们使用了三种EV分离技术对四位健康捐献者的唾液样本进行处理：聚合物沉淀（PP）、膜亲和力分离（MA）和尺寸排阻色谱法（SEC）。所获得的囊泡通过透射电子显微镜（TEM）、SDS-PAGE和Western blot（WB）以及传统的纳米粒子追踪分析（NTA）和干涉式纳米粒子追踪分析（iNTA）进行了表征。结果表明，所有分离方法均成功富集了尺寸分布相似的EV。然而，在囊泡产量及阳性EV标记物的检测能力方面存在差异，这可能反映了囊泡完整性和样本纯度的不同。通过NTA和iNTA方法对粒子数进行评估后发现，MA处理样本的EV数量存在显著差异，而其他富集方法处理的样本则没有此类差异，这说明分析方法的选择至关重要。本研究阐明了三种唾液EV分离方法的优点和潜在缺点，并强调了多模式分析（结合EV标记物检测、成像技术以及NTA和iNTA）对EV样本研究的重要性。
Fanni Annamária Boros|Alexandra Gentschev|Jan Van Deun|Witold Szymanski|Johannes Graumann|Martin Regensburger|Philipp Arnold|Friederike Zunke
