发酵及酶处理金盏花中叶黄素含量HPTLC定量分析方法的建立、优化与验证

《ChemistrySelect》：Development, Optimization, and Validation of an HPTLC Method for Quantification of Lutein in Fermented and Enzyme-Treated Tagetes erecta Linn

　　

摘要

根据ICH Q2(R1)指导原则，开发并验证了一种高效薄层色谱法（HPTLC），用于*孔雀草*（Tagetes erecta L.）花瓣发酵提取物和酶辅助提取物中叶黄素的定量分析。色谱分离在硅胶板上实现，以正己烷–丙酮（6.4:3.6，v/v）为流动相，在450 nm波长处进行密度检测。该方法表现出良好的线性（R² = 0.99）、高精度（%RSD = 0.04–0.12%），检测限和定量限分别为12.78和42.63 μg/条带。经该方法验证后应用发现，经固态发酵（SSF）后进行超声辅助提取（UAE）所得提取物的叶黄素含量最高（63.29 mg g^?1），与未经处理的对照相比提高了3.3倍。发酵和酶辅助提取物的总酚类和黄酮类含量也显著升高（p < 0.05）。TLC-MS分析相应色谱条带产生特征离子，发酵提取物和酶处理提取物分别在m/z 567.0和563.6处检测到特征离子，与叶黄素及相关类胡萝卜素成分的存在一致。这些结果表明，经验证的HPTLC方法为叶黄素定量提供了可靠的方法，并突出了生物工艺辅助提取策略在提高T. erecta L.类胡萝卜素回收率方面的有效性。

图形摘要

对Tagetes erecta L.花瓣进行固态发酵（SSF）和酶处理，随后进行富含叶黄素组分的超声辅助提取（UAE）。使用高效薄层色谱法（HPTLC）对提取物进行分析。将叶黄素标准品和样品提取物点样于硅胶HPTLC板上，使用优化的己烷：丙酮流动相进行色谱展开，并在450 nm波长下进行密度扫描。所得色谱条带和密度图使能够对未经处理、发酵和酶处理的金鸡菊花瓣提取物中的叶黄素进行鉴定和定量。

利益冲突声明

作者声明不存在利益冲突。

数据可用性声明

支持本研究结果的数据可在合理要求下向通讯作者索取。