委内瑞拉中部地区马边虫体（Anaplasma marginale）的分子检测：基于 PCR 的 msp2 和 msp5 基因评估

《Acta Parasitologica》：Molecular Detection of Anaplasma marginale in the Central Region of Venezuela: A PCR-based Assessment of the msp2 and msp5 Genes

【字体：大中小】 时间：2026年10月14日 来源：Acta Parasitologica 1.5

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　　摘要背景牛无形体病降低了牛的生产率，使得及时准确的诊断对于流行病学监测至关重要。目的为了探索除靶向单拷贝msp5基因的参照引物组19A/19B之外的病原体检测替代引物，并更新流行病学数据，我们评估了针对多拷贝msp2基因设计的引物（使用保守末端区域，即msp2A/B）的分析和

摘要

背景

牛无形体病降低了牛的生产率，使得及时准确的诊断对于流行病学监测至关重要。

目的

为了探索除靶向单拷贝msp5基因的参照引物组19A/19B之外的病原体检测替代引物，并更新流行病学数据，我们评估了针对多拷贝msp2基因设计的引物（使用保守末端区域，即msp2A/B）的分析和现场性能。我们还描述了委内瑞拉多个地区特定抽样牛群中A. marginale（边缘无形体）的流行情况。

方法

对PCR条件进行了标准化，并评估了msp2A/B和19A/B的分析灵敏度。现场评估涉及来自委内瑞拉四个不同地理区域（Aragua、Cojedes、Guárico和Miranda）小型农场的208头牛，分为具有不同临床特征的两组。

结果

两套引物组均能以低至0.01 ng的浓度检测到病原体。在经历无形体病爆发的24头牛群中，使用引物msp2A/B和19A/B的阳性率分别为12.5%和66.67%。将一个阳性现场样本扩增子进行克隆和测序以确认细菌身份，与参考菌株Florida的BLAST一致性为97%且完全覆盖。此外，与参考分离株相比，在5′端和3′端分别检测到10个和5个核苷酸替换。这表明该基因末端存在异质性，可能导致msp2A/B诊断性能的降低。此外，仅使用19A/B分析的184头临床健康牛显示出41.85%的亚临床流行率。

结论

在一个近期分子报告有限的国家，这些发现强调了持续性感染的流行病学意义。本研究也是首次报告委内瑞拉A. marginale分离株的msp2序列，为A. marginale的遗传多样性提供了初步见解，并支持在委内瑞拉使用基于msp5的PCR进行常规现场检测和监测。

背景

牛无形体病降低了牛的生产率，使得及时准确的诊断对于流行病学监测至关重要。

目的

为了探索除靶向单拷贝msp5基因的参照引物组19A/19B之外的病原体检测替代引物，并更新流行病学数据，我们评估了针对多拷贝msp2基因设计的引物（使用保守末端区域，即msp2A/B）的分析和现场性能。我们还描述了委内瑞拉多个地区特定抽样牛群中A. marginale（边缘无形体）的流行情况。

方法

对PCR条件进行了标准化，并评估了msp2A/B和19A/B的分析灵敏度。现场评估涉及来自委内瑞拉四个不同地理区域（Aragua、Cojedes、Guárico和Miranda）小型农场的208头牛，分为具有不同临床特征的两组。

结果

两套引物组均能以低至0.01 ng的浓度检测到病原体。在经历无形体病爆发的24头牛群中，使用引物msp2A/B和19A/B的阳性率分别为12.5%和66.67%。将一个阳性现场样本扩增子进行克隆和测序以确认细菌身份，与参考菌株Florida的BLAST一致性为97%且完全覆盖。此外，与参考分离株相比，在5′端和3′端分别检测到10个和5个核苷酸替换。这表明该基因末端存在异质性，可能导致msp2A/B诊断性能的降低。此外，仅使用19A/B分析的184头临床健康牛显示出41.85%的亚临床流行率。