腺嘌呤碱基编辑介导TOX/ARHGEF1双靶敲低增强肿瘤浸润性淋巴细胞在胰腺癌中的抗肿瘤活性

《Oncogenesis》：ABE-mediated dual targeting of TOX and ARHGEF1 synergistically enhances antitumor activity of tumor-infiltrating lymphocytes in PDAC

摘要

肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs）在实体瘤中是一种极具前景的免疫治疗模式，然而其在胰腺导管腺癌（PDAC）中的临床疗效仍受到扩增效率低下和功能耗竭的严重限制。我们从小胰癌手术标本中分离TILs，并发现其在持续暴露于肿瘤的环境下会逐渐表现出功能损伤。因此，我们利用腺嘌呤碱基编辑（ABE）技术选择性靶向TILs中多个与耗竭相关的基因。我们发现，同时敲低TOX和ARHGEF1可产生显著的协同效应，具体表现为细胞因子分泌显著增强、PD-1和TIM-3等耗竭标志物表达降低以及T细胞增殖能力改善。在功能层面，TOX/ARHGEF1双基因敲低增强了TILs对匹配肿瘤类器官的细胞毒性，并在体内展现出更优的抗肿瘤效果。机制研究进一步表明，这种功能增强与基因编辑后TILs中IL-21信号通路的激活及STAT3磷酸化水平升高密切相关。综上所述，我们的研究结果表明，通过ABE介导的TOX和ARHGEF1双靶共靶向，可有效缓解TILs的功能耗竭并增强其在PDAC中的抗肿瘤活性，从而为优化基因工程化TIL免疫治疗提供了机制层面的洞察与转化依据。