《Food Chemistry》:The weak gluten paradox: Post-hydrolysis protein reaggregation and glutenin ratio synergistically retard starch digestion
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•水解逆转了强度依赖型淀粉消化模式。•水解后蛋白质重新聚集有利于形成致密的蛋白-淀粉基质。•麦谷蛋白富集使不可提取蛋白含量从5.78%提升至26.33%。•提高醇溶蛋白比例会削弱弱面筋中的结构屏障。•重组网络与界面相互作用调控淀粉消化。引言淀粉是面粉的主要成分,在人体营养中作
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水解逆转了强度依赖型淀粉消化模式。
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水解后蛋白质重新聚集有利于形成致密的蛋白-淀粉基质。
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麦谷蛋白富集使不可提取蛋白含量从5.78%提升至26.33%。
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提高醇溶蛋白比例会削弱弱面筋中的结构屏障。
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重组网络与界面相互作用调控淀粉消化。
引言
淀粉是面粉的主要成分,在人体营养中作为重要的膳食能量来源。然而,长期过量摄入富含淀粉的食物与代谢性疾病的患病风险升高密切相关,包括肥胖、2型糖尿病和高血压(Li等人,2024)。大量研究表明,淀粉的可消化性在很大程度上取决于其内在结构特性,如颗粒大小和密度(Parada & Aguilera, 2009)、直链淀粉与支链淀粉的比例(Yang等人,2025)、结晶类型(Wang等人,2023)以及短程分子有序性(Tan等人,2025)。除这些内部因素外,消化性还受到与非淀粉成分复杂相互作用的强烈影响。这些相互作用的基质成分主要包括蛋白质(Wu & Warren, 2023)、脂质(Chen等人,2025)和多酚类化合物(Meng等人,2025)。
面筋是面粉中仅次于淀粉的第二丰富宏量营养素。它主要由聚合态麦谷蛋白和单体态醇溶蛋白组成。麦谷蛋白占面筋复合物的30%至40%,分子量范围在105至107 Da之间。醇溶蛋白占40%至50%,由分子量在3×104至8×104 Da之间的较小分子组成(Zou等人,2015)。在含淀粉食品的热加工过程中,这些蛋白质与淀粉之间的相互作用在调节消化动力学方面起着关键作用(Liu等人,2024)。聚合蛋白可包裹在淀粉颗粒表面形成坚固的物理屏障。该屏障限制了水分吸收,限制了糊化,最终阻碍了酶解水解(Zou等人,2015)。例如,Yao等人(2020)表明,面条中致密的面筋网络显著延缓了淀粉消化。他们发现,面筋含量超过14%会形成坚硬的内部分子结构,从而大幅降低淀粉消化性。在此基础上,我们之前的研究揭示,面筋网络的固有强度和麦谷蛋白与醇溶蛋白的比例共同通过改变淀粉的长程和短程分子有序性来决定淀粉消化谱。在中等及弱面筋体系中提高麦谷蛋白比例可显著增强淀粉对酶降解的抗性(Zou等人,2022)。在相同的近等基因重组面粉模型中,未水解的强面筋体系(2001)表现出比低强度2002体系更强的淀粉消化抗性,表现为较高的抗性淀粉含量和较低的快速消化淀粉含量,而慢消化淀粉含量的差异不显著(表S1)。
然而,面筋网络的孔径在微米级别,远大于α-淀粉酶的大小(约4 nm)(Payan等人,1980)。这表明宏观物理屏障效应不是面筋限制淀粉消化的唯一机制。淀粉酶对面筋蛋白的非催化结合,尤其是对面筋水解物的结合,已成为增强淀粉消化抗性的关键因素,但此前一直被忽视(Li等人,2021)。Xu等人(2021)发现,水解1小时的面筋蛋白通过氢键介导的与淀粉的相互作用显著抑制了α-淀粉酶的活性。Lu等人(2023)探讨了不同水解时间的面筋蛋白对淀粉消化特性的影响,发现更长的水解时间可促进更多疏水性肽和极性氨基酸的形成。这些肽由于空间位阻较小,可以更紧密地与淀粉分子结合,形成致密的微聚集体,在一定程度上阻碍酶的进攻。
此外,面筋衍生的蛋白质和肽可以直接与α-淀粉酶形成复合物或阻碍酶-淀粉相互作用界面(Zou等人,2016)。面筋蛋白的类型和分子量显著影响其结合淀粉酶的能力,从而提高淀粉的抗消化性(Chen等人,2019;Li等人,2023)。该相互作用的大小依赖性已被直接研究。Xiong等人(2023)将胃蛋白酶水解释放的面筋肽进行了分级分离,并使用表面等离子体共振技术分析了它们与α-淀粉酶的结合。分子量在10 kDa以上的肽组分,包括富集10-17和35-48 kDa肽的组分,快速且强地与α-淀粉酶结合,并显著抑制酶活性和淀粉消化。分子量在10 kDa以下的肽结合极弱,几乎没有抑制作用。因此,较大的肽种类而非小的水解产物似乎是淀粉酶的有效抑制剂。这种大小依赖性符合一种机制,即消化抗性由系统中形成的蛋白物种的大小和缔合状态决定,而非单个小肽的迁移性。
基于这些进展,我们假设面筋通过双重机制调节淀粉消化性:宏观上由重组蛋白网络限制酶的可达性,微观上涉及面筋水解物的分子相互作用。由于面筋的固有强度和麦谷蛋白与醇溶蛋白比例从根本上决定了其水解物的分子大小分布和理化性质,不同面筋来源的水解物应对淀粉消化表现出不同的调节效应。本研究的创新之处在于将初始面筋强度和麦谷蛋白与醇溶蛋白比例与水解物驱动的网络重构和界面相互作用联系起来,从而揭示了弱面筋水解物在调控淀粉消化中强度依赖型模式的逆转。因此,本研究选取两种不同强度的面筋蛋白进行麦谷蛋白和醇溶蛋白分离,以不同比例重新组合并进行酶水解。通过评估体外消化性、多尺度结构演变(蛋白质和淀粉)以及水解物-酶热力学相互作用,本研究旨在阐明面筋的初始强度和组成如何决定其水解物的网络重构,从而为评估蛋白质介导的调控小麦基食品体系中淀粉消化性的策略提供机制基础。
章节摘要
材料
如我们之前的研究所述(Wang等人,2022;Zou等人,2022),通过杂交中国冬小麦品种小偃22(N/7 + 9/2 + 12)与法国小麦品种738(N/17 + 18/5 + 10),利用连续回交和自交,培育出高分子量麦谷蛋白亚基不同的近等基因系。在这些BC?F?近等基因系中,三个由编号2001(N/7 + 9/5 + 10)、2002(N/7 + 9/2 + 12)和
重组面粉中淀粉的体外消化特性
与之前报告的未水解样品(Zou等人,2022)相比,酶处理的重组面粉表现出更强的淀粉消化抗性,表现为较低的快速消化淀粉含量和较高的慢消化淀粉含量,尽管抗性淀粉含量并不总是增加(图1B;表S1)。该结果与Zou等人(2015)的报道一致,他们报告完整的面筋网络和致密的面
结论
本研究为淀粉消化性提供了机制视角,表明面筋水解物通过蛋白网络重构以及界面蛋白-淀粉和蛋白-酶相互作用的协同效应调节淀粉消化动力学,这可能减少了淀粉对酶的可达性。我们表明,酶解破坏了天然面筋的结构约束。重组网络伴随着短程双螺旋结构的增加
CRediT作者贡献声明
邹小阳:撰写—初稿、软件、方法学、调查。王小龙:撰写—审阅与编辑、监督、经费获取、形式分析、概念化。胡新忠:监督、资源。
利益冲突声明
作者声明不存在已知的竞争经济利益或个人关系可能影响本文所述工作。
致谢
作者感谢国家自然科学基金(编号31801460)、国际科学技术合作计划—陕西省重点项目(编号S2022-YF-GHZD-0035)、中央高校基本科研业务费(编号CK202003088)以及陕西国际科技合作基地(编号3782018SD0015)的支持。
邹小阳|王小龙|胡新忠