基于SYBR Green自制实时PCR法用于HBV DNA定性检测的开发与验证

《BMC Research Notes》：A cost-effective SYBR Green based Real-Time PCR platform for reliable detection of Hepatitis B virus: Establishment and clinical validation

【字体：大中小】 时间：2026年10月15日 来源：BMC Research Notes 1.7

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　　摘要目标乙型肝炎病毒（HBV）仍然是全球面临的主要健康挑战，准确、快速且经济实惠的分子诊断技术对于及时检测至关重要，尤其是在资源有限的地区，商业分子检测试剂往往难以获得。本研究旨在建立并验证一种基于SYBR Green的自制实时PCR检测方法，用于血清和血浆中HBV DNA的

摘要

目标

乙型肝炎病毒（HBV）仍然是全球面临的主要健康挑战，准确、快速且经济实惠的分子诊断技术对于及时检测至关重要，尤其是在资源有限的地区，商业分子检测试剂往往难以获得。本研究旨在建立并验证一种基于SYBR Green的自制实时PCR检测方法，用于血清和血浆中HBV DNA的定性检测，作为商业检测试剂的可靠且经济高效的替代方案。

结果

本研究开发并验证了一种靶向HBV S基因的自制SYBR Green实时PCR检测方法。采用具有临床意义的相关病原体评估分析特异性，并通过HBV DNA的系列稀释确定分析灵敏度。临床性能通过112份患者样本进行评估，并与商业实时PCR检测方法进行比较。该检测方法展现出100%的分析特异性和10 IU/mL的检出限。诊断灵敏度和特异度分别为95.74%（95% CI：85.75–98.83）和100%（95% CI：94.42–100.00），阳性预测值为100%，阴性预测值为97.01%。与商业检测方法的符合性具有显著性（Pearson χ2 = 104.03，*p* < 0.001），检测方法间变异率 < 1%。自制检测方法将试剂成本降低了约78%（每次检测5.32美元 vs 24.69美元），同时保持了与商业参考检测方法相当的诊断性能，支持其在资源有限地区用于常规HBV诊断。

目标

乙型肝炎病毒（HBV）仍然是全球面临的主要健康挑战，准确、快速且经济实惠的分子诊断技术对于及时检测至关重要，尤其是在资源有限的地区，商业分子检测试剂往往难以获得。本研究旨在建立并验证一种基于SYBR Green的自制实时PCR检测方法，用于血清和血浆中HBV DNA的定性检测，作为商业检测试剂的可靠且经济高效的替代方案。

结果

本研究开发并验证了一种靶向HBV S基因的自制SYBR Green实时PCR检测方法。采用具有临床意义的相关病原体评估分析特异性，并通过HBV DNA的系列稀释确定分析灵敏度。临床性能通过112份患者样本进行评估，并与商业实时PCR检测方法进行比较。该检测方法展现出100%的分析特异性和10 IU/mL的检出限。诊断灵敏度和特异度分别为95.74%（95% CI：85.75–98.83）和100%（95% CI：94.42–100.00），阳性预测值为100%，阴性预测值为97.01%。与商业检测方法的符合性具有显著性（Pearson χ2 = 104.03，*p* < 0.001），检测方法间变异率 < 1%。自制检测方法将试剂成本降低了约78%（每次检测5.32美元 vs 24.69美元），同时保持了与商业参考检测方法相当的诊断性能，支持其在资源有限地区用于常规HBV诊断。