开发并验证了一种用于定量检测直肠栓剂中托诺昔康的可持续稳定性指示RP-HPLC方法：该方法应用于溶出度测试、含量均匀性研究及降解途径的探讨

《Sustainable Chemistry and Pharmacy》：Development and validation of a sustainable stability-indicating RP-HPLC method for the quantitative determination of tenoxicam in rectal suppositories: Applications to dissolution testing, content uniformity, and proposed degradation pathways

摘要

开发并验证了一种快速、灵敏且环保的RP-HPLC方法，用于测定十氧卡姆（TEN）在散装药物和新型注册剂型——直肠栓剂中的含量。同样的色谱条件也成功应用于含量均匀性和溶出度测试。分离是在Hypersil BDS C18柱（150 × 4.6 mm，5 μm）上进行的，移动相为0.025 M磷酸钾缓冲液（磷酸钾缓冲液通过将3.4克磷酸二氢钾溶解在1升pH 3.5的二次蒸馏水中，并用85%（w/v）的浓正磷酸调节）和乙醇（60:40，v/v）组成，流速为1.0 mL/min，检测波长为375 nm，分析时间为3.731 min ± 0.132。该方法在0.55–33.00 μg/mL范围内表现出优异的线性（R2 = 0.9999），检出限和定量限分别为0.02 μg/mL和0.06 μg/mL。回收率在99.80%到100.94%之间，精密度RSD值低于2.0%。该方法对流量、柱型和检测波长的轻微变化具有较好的稳定性。强制降解研究表明，在酸性、碱性、氧化、热和光解条件下，TEN的降解率分别为7.00%、3.48%、8.31%、2.94%和0.29%，降解产物与TEN有良好的分离效果。根据AGREE、AGSA、BAGI、CaFRI、AES、MoGAPI、SAMI、AGREEprep、AGSA-prep和TriCA的评分，该方法的环境可持续性良好，得分分别为0.61、69.44、72.50、91.00、88.00、78.00、38.00、0.63、71.00%和75.00%。该方法适用于TEN直肠栓剂的常规质量控制、含量均匀性、溶出度和稳定性评估。

引言

十氧卡姆（TEN）是一种非甾体抗炎药（NSAID），具有镇痛和抗炎作用，广泛用于治疗轻度至中度疼痛以及炎症性疾病，如类风湿性关节炎和骨关节炎。TEN的直肠栓剂配方中通常包含固体脂肪、丙二醇单硬脂酸酯和Cremophor等辅料，这些辅料有助于提高制剂的稳定性、药物释放和整体性能。将TEN制成直肠栓剂是为那些无法耐受口服药物或口服可能导致不良反应（如胃肠道不耐受、吞咽困难、恶心和呕吐）的患者提供另一种给药途径。当口服给药受到影响时，直肠给药途径还可以实现药物吸收，同时利用TEN较长的半衰期来维持持续的镇痛和抗炎效果。TEN是一种黄色结晶粉末，水溶性非常低，几乎不溶于水，微溶于氯仿，仅微溶于无水乙醇，在酸性和碱性介质中溶解度有所提高。该药物的分子式为C13H11N3O4S2，分子量为337.4 g/mol（图1）。其他理化特性包括CAS登记号为59804-37-4，pKa约为5.3，logP值为1.9，表现出中等的脂溶性，这可能影响其在制药和生物制药领域的应用（DrugBank在线；英国药典，2026a）。

已有多种分析方法用于测定TEN，包括电位法（英国药典，2026a；Mohamed等人，2002；Khaled等人，2015；El-Ries等人，2003；Kormosh等人，2025；Guzmán-Hernández等人，2012）、高效液相色谱（HPLC）（英国药典，2026b；Demiralay等人，2009；Antonoaea等人，2017；Mason和Hobbs，1995；Singh等人，2007；Semreen和Aboul-Enein，2010；Al-Saadi等人，2026；Costa等人，2026；Dereli，2022；Nemutlu等人，2007）、紫外（UV）分光光度法（El-Ries等人，2003；英国药典，2026c）、液相色谱–质谱（LC–MS）（Ji等人，2005；RATHORE和REDDY，2024；McKinney等人，2004）以及薄层色谱（TLC）结合密度计检测（Starek等人，2011）。

本文提出的方法相比以往报道的方法具有 beberapa 显著优势和新颖性。据我们所知，目前尚未有利用单一色谱条件在同一组条件下同时对从溶出度和含量均匀性测试中获得的直肠栓剂样品中的TEN进行测定的HPLC方法，并且分析时间如此短。这种方法为常规质量控制提供了便利，因为可以在相同的色谱条件下进行这两种测试，从而避免了每次测试之间修改分析程序的需要。此外，该方法在复杂栓剂辅料存在的情况下以及低分析物浓度下仍能提供可靠且灵敏的定量结果，进一步增强了其在常规药品质量控制中的适用性。溶出度和含量均匀性的应用符合相关的药典/法规要求。其次，与以往报道的方法相比，该方法具有更好的环境可持续性、更低的运营成本和更高的分析效率，特别是Demiralay等人（2009；Al-Saadi等人，2026）描述的流程，以及Akabari等人（2026a，2026b；Patel等人，2026；Rabadiya等人，2025；Marques等人，2023）推荐的流程。为了展示这些改进，本文对提出的方法与已发表的HPLC方法进行了全面比较，考虑了分析性能、分析时间、溶剂消耗、灵敏度和可持续化学特性。此外，本研究还探讨了TEN在五种不同应力条件下的潜在降解途径，为其稳定性提供了有价值的见解，并证明了该方法作为稳定性指示分析程序的潜在适用性；然而，对降解产物的结构确认仍然是本研究的局限。

随着对绿色分析化学（GAC）的重视日益增加，人们致力于开发能够减少有害化学物质消耗、废物产生和环境影响的同时保持分析质量的分析方法。在GAC的十二项原则指导下（Anastas和Warner，1998；Ga?uszka等人，2013），引入了许多评估指标来衡量分析方法的环境可持续性，尽管这些指标在范围和评估标准上有所不同。根据现有文献，尚未有针对TEN直肠栓剂的环保型HPLC方法能够在相同的色谱条件下同时支持溶出度测试和含量均匀性评估。

因此，本研究的目的是建立并验证一种快速、简便、能够指示稳定性的环境可持续HPLC方法，用于药物制剂中TEN的定量测定。该方法专为常规应用开发，包括溶出度和含量均匀性测试，特别是处理受压样品，并根据ICH和US FDA的建议进行了验证（国际协调会议，2023；英国药典，2026d；美国药典等，USPNF，在线；美国食品药品监督管理局）。其环境和可持续性表现通过多个公认的工具进行了全面评估，包括AGREE（Pena-Pereira等人，2020）、CaFRI（Mansour和Nowak，2025）、CACI（Mansour等人，2025a）、AGSA（Mansour等人，2025b）、Analytical Eco-Scale（AES）（Ga?uszka等人，2012）、改良的MoGAPI（Mansour等人，2024）、BAGI（Manousi等人，2023）、AGREEprep（Locatelli等人，2023；Perrucci等人，2026）、AGSA-prep（Mansour等人，2026a）、SAMI（Mansour等人，2026b）、AMRI、WECA和TriCA等。

章节摘录

仪器设备

使用前，移动相在真空条件下通过Rocker 400过滤装置（台湾）进行过滤以去除颗粒物。移动相的脱气和样品的萃取是在WUC-D06H超声波浴（韩国）中完成的，序列号：20230210524001。

色谱测量是在配备光电二极管阵列（PDA）检测器的Shimadzu LC-2030C 3D Plus高效液相色谱系统上进行的，序列号：L21455812682。仪器控制……

结果与讨论

所提出的快速RP-HPLC方法是一种可持续、经济高效、灵敏且多用途的分析方法，在常规药品分析中具有潜在应用价值。其优点总结如下：

所开发的色谱程序能够在使用相同色谱条件下，同时评估新开发的直肠栓剂制剂在含量均匀性和溶出度研究中的TEN含量。

局限性与未来展望

尽管所提出的方法在分析性能上具有很好表现，但仍需承认一些局限性。该方法目前仅在校准用于散装药物、溶出样品和直肠栓剂制剂的TEN测定。其在更复杂的生物基质（如血浆或血清）中的适用性尚未确立。虽然优化的色谱条件为药品提供了出色的选择性和灵敏度……

结论

成功开发并验证了一种简单、快速、准确、精确且能指示稳定性的RP-HPLC方法，用于测定直肠栓剂和溶出样品中的TEN含量。该方法在0.55–33.00 μg/mL范围内表现出优异的线性（R2 = 0.9999），检出限和定量限低（0.02 μg/mL和0.06 μg/mL），准确度较高（回收率99.80–100.94%），精密度良好（RSD <2.00%），证实其适用于常规质量控制。该方法还表明……

CRediT作者贡献声明

Ahmed Sobhy Darwish：写作 – 审稿与编辑，撰写原始草稿，数据可视化，验证，资源准备，方法学设计，实验研究，数据分析，概念构思。Mohamed Samir Ahmed Zaki：资源准备，项目管理，资金募集。Ayyub Ali Patel：资源准备，资金募集。Ayaz Khurram Mallick：资源准备，资金募集。Marya Ahsan：资源准备，资金募集。Hend A. Elakkad：写作 – 审稿与编辑，实验研究。Ahmed Wageh：

伦理规范、参与同意及出版同意

所有作者确认他们符合伦理要求，对这项工作作出了实质性贡献，并同意将其提交出版。

资金声明

作者感谢Khalid大学的研究与研究生院通过大型研究组计划（项目编号RGP2/64/47）资助了这项工作。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文工作报告的财务利益或个人关系。

致谢

作者感谢Khalid大学的研究与研究生院通过大型研究组计划（项目编号RGP2/64/47）资助了这项工作。

作者衷心感谢E.I.P.I.Co.提供参考文献、化学试剂和必要的实验设施以完成这项研究。

Ahmed Sobhy Darwish|Mohamed Samir Ahmed Zaki|Ayyub Ali Patel|Ayaz Khurram Mallick|Marya Ahsan|Hend A. Elakkad|Ahmed Wageh|Wageh Sobhy Darwish

埃及Zagazig大学理学院化学系