基于QbD优化的稳定性指示反相HPLC法同时测定三联固定剂量吸入制剂中三种活性成分的定量分析与绿色度评估

《BMC Chemistry》：Stability-indicating RP-HPLC method for simultaneous determination of formoterol fumarate, glycopyrrolate, and fluticasone propionate in pharmaceutical formulations

摘要

本研究开发并验证了一种稳定性指示反相高效液相色谱法，用于同时定量测定三联固定剂量吸入制剂中的富马酸福莫特罗、格隆溴铵和丙酸氟替卡松。该方法采用C18色谱柱（300 mm × 3.9 mm，4 μm），梯度洗脱（0.1%甲酸水溶液与乙腈:甲醇[1:1]含0.1%甲酸，流速1.0 mL/min），在保留时间3.206 min（格隆溴铵）、6.882 min（富马酸福莫特罗）和21.960 min（丙酸氟替卡松）处实现了优异的峰分离度。通过AQbD框架下的Box-Behnken设计进行优化，确保了方法的稳健性，综合可接受度为1.000。该方法在线性范围内（r2 ≥ 0.9999），富马酸福莫特罗和格隆溴铵为5–25 μg/mL，丙酸氟替卡松为120–360 μg/mL，检出限为0.110–1.454 μg/mL，定量限为0.332–4.406 μg/mL。精密度（%RSD < 1.6%）和准确度（回收率98.5–101.2%）表现优异，系统适用性参数（拖尾因子 < 2.0，理论塔板数 > 18,000，分离度 > 26）符合ICH Q2(R1)标准。在ICH Q1A(R2)条件下的强制降解研究显示，氧化胁迫下降解程度最大（富马酸福莫特罗：18.86%，格隆溴铵：14.88%，丙酸氟替卡松：15.57%），降解产物与主峰分离良好，物料平衡超过80%。利用AGREE指标（评分：0.71）和白色分析化学框架进行的绿色度评估证实了该方法的环境可持续性和分析效率。该稳健、灵敏且环保的方法非常适合用于三联组合吸入剂的常规质量控制和监管评估，推动了可持续药物分析的发展。