开发一种结合 SYBR Safe 的种特异性 PCR-侧向层析检测技术用于市售何首乌藤（夜交藤）的快速鉴定

《Journal of Natural Medicines》：Development of a species-specific PCR-lateral flow assay integrated with SYBR Safe for rapid authentication of commercial Polygoni Multiflori Caulis (Ye-Jiao-Teng)

摘要*Pleuropterus multiflorus*（PM）是中医药（TCM）中广泛应用的一种植物。然而，与其亲缘关系密切的*Pleuropterus angulatus*（PA）由于形态上的相似性常被误认为PM，导致商用何首乌藤（Polygoni Multiflori Caulis，PMC）产品中频繁出现掺假。为解决这一问题，我们开发了一种与SYBR Safe结合的种特异性PCR侧向层析检测方法，用于快速、种特异性地鉴定PM和PA。基于叶绿体*trnL-trnF*区域内诊断性单核苷酸多态性（SNP）设计了种特异性引物。在验证特异性后，通过侧向层析试纸条实现了PM和PA的可视化检测。该检测方法的检出限为PM基因组DNA 0.5 ng/μL和PA基因组DNA 0.05 ng/μL。将该检测方法应用于十八种商用PMC产品，结果显示所有样品中均含有PA，仅有一种产品同时含有PM和PA，表明草药市场上掺假现象普遍。总之，所开发的PCR-侧向层析检测方法提供了一种快速、灵敏且易于使用的分子诊断工具，适用于草药产品的真实性检测和制药生产过程中的质量控制。图形摘要