糖酶与蛋白酶的互补作用提高高温脱脂豆粕的蛋白质溶解度：基于蛋白质组学与多光谱双重视角的机理分析

《Food and Bioprocess Technology》：Complementary Actions of Carbohydrase and Protease Enhance Protein Solubility in High-Temperature Defatted Soybean Meal: Mechanistic Analysis from the Dual Perspectives of Proteomics and Multispectral

摘要

本研究采用序贯半纤维素酶（HC）或纤维素酶（CEL）预处理，随后进行碱性蛋白酶（AP）水解，以提高高温脱脂豆粕（HS）的蛋白质水溶性。与传统的基于溶解度的评价方法不同，本研究结合蛋白质组学和多光谱表征技术，以区分基质松散化、酸诱导的重聚和解聚降解过程。序贯HC-AP处理使可溶性粗蛋白含量提高到58.65%，氮溶解度指数达到58.53%。蛋白质组学分析表明，HC/CEL预处理释放了与基质相关的非贮藏蛋白，包括胞质酶以及与蛋白质加工和氧化还原调节相关的蛋白，但也降低了某些原本可溶性蛋白的可检测性，这可能是由于在等电点附近发生重聚所致。HC/CEL还扩大了AP可作用的蛋白质池，而AP则将完整蛋白质转化为较小的可溶性片段。与这些组成变化一致的是，光谱和电泳结果表明，蛋白质-多糖相互作用减弱，构象更加松散，且分子量发生了重新分布。这些发现阐明了HS的两阶段溶出机制。

图文摘要

本研究采用序贯半纤维素酶（HC）或纤维素酶（CEL）预处理，随后进行碱性蛋白酶（AP）水解，以提高高温脱脂豆粕（HS）的蛋白质水溶性。与传统的基于溶解度的评价方法不同，本研究结合蛋白质组学和多光谱表征技术，以区分基质松散化、酸诱导的重聚和解聚降解过程。序贯HC-AP处理使可溶性粗蛋白含量提高到58.65%，氮溶解度指数达到58.53%。蛋白质组学分析表明，HC/CEL预处理释放了与基质相关的非贮藏蛋白，包括胞质酶以及与蛋白质加工和氧化还原调节相关的蛋白，但也降低了某些原本可溶性蛋白的可检测性，这可能是由于在等电点附近发生重聚所致。HC/CEL还扩大了AP可作用的蛋白质池，而AP则将完整蛋白质转化为较小的可溶性片段。与这些组成变化一致的是，光谱和电泳结果表明，蛋白质-多糖相互作用减弱，构象更加松散，且分子量发生了重新分布。这些发现阐明了HS的两阶段溶出机制。

图文摘要