摘要
背景
细胞异种移植通过利用异源细胞引发宿主强烈的免疫反应，为癌症提供了独特的免疫治疗策略。非肌层浸润性膀胱癌（NMIBC）由于现有标准疗法的疗效有限，亟需创新治疗手段。膀胱内异种猪尿路上皮细胞（PUC）免疫治疗提供了一种新的作用机制选择。
目的
本研究在体外和体内条件下评估利用原代PUC进行细胞异种移植，以表征其作为NMIBC膀胱内免疫治疗药物的潜力。
方法
首先利用流式细胞术和全转录组测序对原代PUC的表型和转录组身份进行表征。随后研究了碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和ROCK抑制剂Y-27632对PUC扩增能力、基因表达和衰老的影响。通过细胞共培养生物测定测量免疫刺激能力，并在小鼠膀胱内灌注后评估体内生物分布和免疫募集情况。
结果
扩增后的PUC表现出高上皮纯度（92.16% ± 5.38% CD49f+）。RNA-seq图谱确证了其独特的尿路上皮身份（如UPK3A、TP63、KRT7），非监督聚类明确区分了PUC与骨骼肌对照。bFGF与Y-27632联合处理协同促进细胞生长并上调分化标志物，同时显著抑制p16介导的衰老。PUC通过直接的、F-肌动蛋白极化的相互作用，显著刺激免疫细胞增殖及IFN-γ/IL-2分泌。体内实验中，PUC保持局部定位并在28天内被清除，在第14天诱发CD4+和CD8+ T细胞的峰值募集，并增强全身性细胞毒性。
结论
PUC作为一种强效、局部化且短暂的细胞药物，能够激发全身性抗肿瘤类免疫应答。优化的扩增方案有助于规模化生产非衰老猪细胞，用于膀胱癌的临床应用。
利益冲突
黄启平（Chi-Ping Huang）和陈志荣（Chih-Rong Shyr）持有与异种细胞免疫治疗相关的专利和专利申请。陈志荣是eXCELL Biotherapeutics公司的带薪雇员。黄启平和陈志荣持有eXCELL Biotherapeutics公司的股票。其他人未声明存在利益冲突。
