《Journal of Chromatography A》：Simplifying the Simultaneous Bioanalysis of Chlorzoxazone and Ketoprofen in Plasma Using Salting-Out-Assisted HPTLC-Densitometry with Comparative Multi-Metric Sustainability Assessment
编辑推荐：
•采用高效薄层色谱（HPTLC-SALLE）技术对人类血浆中的CHZ和KTP进行生物分析。•优化后的SALLE技术提高了分析物的回收率，并减少了血浆基质的干扰。•对样品的白度、绿度和蓝度进行了多指标比较评估。•在实际血浆样本中应用该方法，所得浓度与报道的Cmax数据一致。引言5-
- •
采用高效薄层色谱（HPTLC-SALLE）技术对人类血浆中的CHZ和KTP进行生物分析。
- •
优化后的SALLE技术提高了分析物的回收率，并减少了血浆基质的干扰。
- •
对样品的白度、绿度和蓝度进行了多指标比较评估。
- •
在实际血浆样本中应用该方法，所得浓度与报道的Cmax数据一致。
引言
5-氯苯并[d]噁唑-2(3H)-酮（CHZ，图1）属于中枢作用的骨骼肌松弛剂，广泛用于治疗与痉挛相关的肌肉骨骼疾病[1]。酮洛芬（KTP，图1），即2-(3-苯甲酰苯基)丙酸，属于非甾体抗炎药（NSAID）类，常用于治疗痛风、类风湿性关节炎和骨关节炎等疾病的慢性疼痛[2]。
在过去十年中，已经有多种分析方法用于测定CHZ的含量，包括色谱法[[3], [4], [5]]和荧光光谱法[6]。同样，也有许多方法用于测定KTP的含量，其中大多数方法依赖于分光光度法[[7], [8], [9]]和色谱法[10,11]，还包括荧光光谱法[6]和红外光谱法[12]。
联合使用骨骼肌松弛剂和非甾体抗炎药是治疗肌肉骨骼系统相关疼痛和痉挛的有效方法。CHZ是中枢作用的肌肉松弛剂，而KTP通过外周作用具有镇痛和抗炎效果[13]。Flexofan?胶囊这种固定剂量制剂利用了这两种药物的协同作用，因此需要一种分析方法来测定血浆中这两种药物的浓度。然而，目前用于生物样本中测定CHZ和KTP的方法还相对较少。尽管之前有报道使用反相HPLC的方法[14]，但它仅用于药物制剂的分析，而非生物样本。此外，这种方法存在一些局限性，如需要复杂的仪器、分析时间较长以及使用大量有机溶剂。
除了药物组合的挑战外，血浆也是一种难以处理的分析介质，因为其中含有丰富的蛋白质、脂质和其他细胞成分，这些成分会干扰药物的分析[15]。因此，如盐析辅助的液-液萃取（SALLE）这样的样品预处理步骤对于可靠地测定血浆中的药物非常重要。为了解决这个问题，目前有许多生物分析方法将液相色谱与串联质谱结合使用，能够在一次实验中完成血浆中药物的分析[16]。然而，这种方法的高灵敏度导致设备成本较高且操作复杂。不过，分析方法并不局限于色谱法，最近还出现了用于药物检测的电位感测系统[16]。其他相关研究还包括针对血浆和组织分析的先进仪器，如超高性能液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UHPLC-QTOF-MS）[17]。
为了解决这些局限性，我们开发了一种高效薄层色谱（HPTLC）密度测定方法，并结合了SALLE技术。该方法具有诸多优势：简化了样品制备过程、减少了溶剂消耗、提高了回收率，并增强了环境适应性。此外，使用SALLE技术可以高效地处理真实人体血浆样本，有效减少基质干扰并实现良好的回收率。因此，所提出的方法是一个实用的选择，整个过程耗时较少且操作简单，更适合常规实验室工作。
章节摘录
仪器设备
分析过程中，使用WinCATS软件版本1.4.10（瑞士Muttenz公司）控制CAMAG? TLC扫描仪4。色谱分离在20×20厘米的硅胶60 F254 HPTLC板上进行，板号为HX68974248（德国Darmstadt的Merck公司生产），发展室为Sigma-Aldrich公司生产，尺寸为宽7.0厘米、长27.0厘米、高26.5厘米。样品喷涂使用Linomat 5喷头。
结果与讨论
我们建立并应用了一种结合SALLE技术的可持续且可靠的HPTLC-密度测定方法，用于同时测定真实人体血浆中的CHZ和KTP。优化后的SALLE协议显著提高了提取效率，获得了稳定高的回收率，并且色谱峰分离清晰，没有受到内源血浆成分的干扰。HPTLC条件提供了出色的选择性和分辨率，
结论
我们成功开发并验证了一种快速、经济高效、高通量且环境友好的HPTLC-密度测定方法，该方法结合了盐析辅助的液-液萃取（SALLE）技术，用于同时测定真实人体血浆中的CHZ和KTP。所提出的SALLE程序实现了高提取率和最小的基质干扰，为传统的样品制备技术提供了一种简便且经济高效的替代方法。
作者贡献声明
Tamer Z. Attia: 负责撰写、审阅和编辑、验证、方法学设计、实验研究、数据管理以及概念构建。Shrouk G. Abdulrazik: 负责撰写初稿、验证、软件开发、方法学设计、实验研究、数据分析以及概念构建。Sayed M. Derayea: 负责撰写、审阅和编辑、数据可视化、实验监督、软件开发、方法学设计、数据管理以及概念构建。
作者声明他们没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。
Tamer Z. Attia|Shrouk G. Abdulrazik|Sayed M. Derayea
