NP依赖性条件复制缺陷型SFTSV假病毒的构建及其在抗病毒药物筛选中的应用

《Cellular and Molecular Life Sciences》：Construction of an SFTSV ΔN reporter pseudovirus for antiviral drug screening

摘要

发热伴血小板减少综合征病毒（SFTSV），又称大别班达病毒（DBV），是一种新发人畜共患病原，构成严重的全球公共卫生威胁。对活SFTSV进行实验研究需要生物安全等级3（BSL-3）或更高级别的防护措施，这极大地限制了对其感染机制的研究以及治疗和疫苗的开发。为克服这些限制，我们通过将病毒S节段中的核衣壳蛋白（NP）基因替换为报告基因，构建了一种NP依赖性的条件复制缺陷型SFTSV ΔN假病毒（SFTSV ΔN假病毒）。我们生成了两个版本的ΔN基因组，分别携带大尾溞荧光素酶（Gluc）或绿色荧光蛋白（GFP）报告基因。利用反向遗传学系统，我们成功拯救了表达这些报告基因的SFTSV ΔN假病毒。所得假病毒仅能在以反式方式提供NP的细胞或小鼠组织中复制，从而提高了实验安全性。利用SFTSV ΔN-Luc报告假病毒，我们进行了高通量抗病毒药物筛选，并鉴定出包括芝麻素在内的能有效抑制SFTSV复制的化合物。总之，SFTSV ΔN假病毒是一个强大且安全的平台，可用于研究病毒感染机制、组织嗜性以及筛选抗病毒候选药物。