《Behavioural Brain Research》：Adolescent chronic social stress induces sex-specific behavioral alterations with limited persistence into adulthood
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青少年慢性社会应激诱导性别特异性行为改变，且向成年期持续有限。•急性社会挫败激活了青春期雄性和雌性小鼠的下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴。•重复青少年社会挫败重组了家庭笼社会行为。•行为适应轨迹在雄性和雌性之间不同。•成年行为和性腺内分泌效应适度且具选择性。•
青少年慢性社会应激诱导性别特异性行为改变，且向成年期持续有限。•急性社会挫败激活了青春期雄性和雌性小鼠的下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴。•重复青少年社会挫败重组了家庭笼社会行为。•行为适应轨迹在雄性和雌性之间不同。•成年行为和性腺内分泌效应适度且具选择性。•校正后，青少年适应对成年结局的预测较弱。
论文主体解读
研究背景与问题：社会应激（social stress）是进化上保守的应激来源，与情绪调节及焦虑、抑郁等心境障碍易感性密切相关，并可重塑社会动机、识别、回避和攻击相关神经系统。青春期是脑与行为对应激敏感的关键发育窗口，涉及情绪调节、社会行为和应激反应性神经回路重塑，同时伴随下丘脑-垂体-肾上腺（HPA，hypothalamic-pituitary-adrenal）轴和下丘脑-垂体-性腺（HPG，hypothalamic-pituitary-gonadal）轴成熟。应激与性腺系统交互可影响雌二醇、孕酮和睾酮水平，进而塑造性别依赖性发育轨迹。小鼠是研究社会行为和应激的成熟模型，但经典社会挫败应激（SDS，social defeat stress）依赖雄性领地攻击，女性适用性有限，导致两性常采用不等价范式，难以直接比较。为此，研究人员在统一直接互动框架下，比较青春期雄性和雌性CD-1小鼠对急性社会挫败应激（ASDS，acute social defeat stress）与慢性社会挫败应激（CSDS，chronic social defeat stress）的行为与内分泌反应，并追踪成年结局，以区分即时应激反应性、重复威胁期间行为适应及成年持续性。
关键技术方法概括：实验使用来自Janvier, France的CD-1 outbred小鼠。实验1到达产后日（PD，postnatal day）28，非应激（NS）n=8/性别，应激（S）n=12/性别，同性别4只/笼；PD37–PD38进行ASDS，三次5 min直接身体互动（DPI，direct physical interaction），攻击者为成年雄性CD-1居民，并喷洒混合成年雄性尿液；采集基线与应激后血样，以酶联免疫吸附测定（ELISA，enzyme-linked immunosorbent assay）测皮质酮（CORT，corticosterone）、雌二醇、孕酮和睾酮。实验2到达PD24，NS n=9/性别，S n=15/性别，同性别3只/笼；PD28–PD37进行CSDS，每天两次5 min DPI，使用不同攻击者；D1和D10进行家庭笼10 min前后视频记录，量化活动性、身体接触和个体间距离；PD32、PD38和PD62测CORT，PD59–PD61进行成年行为测试，包括防御退缩测试（DWT）、开场测试（OF）、社会交互测试（SI）、高架十字迷宫（EPM）和蔗糖偏好测试（SPT），PD62终末采血。统计采用混合重复测量ANOVA、主成分分析（PCA，principal component analysis）、Δ指数及Benjamini-Hochberg（BH）/Holm校正。
研究结果
3.1 青春期雄性和雌性小鼠的急性社会挫败应激：通过三次直接互动及血样分析，攻击潜伏期均低于10 s，无显著性别、轮次或性别×轮次效应；直接身体接触随轮次变化，但无显著性别差异或性别×轮次交互。ASDS使雄性和雌性CORT均从基线升高，表明HPA轴激活。PD34基线CORT雄性高于雌性。雌二醇显示性别主效应，雄性更高，应激效应接近显著；孕酮显示性别和应激主效应及性别×应激交互，应激雌性低于对照雌性，雄性无显著差异；睾酮无显著应激、性别主效应或交互，女性名义下降需谨慎解释。结论：ASDS激活HPA轴，并选择性影响孕酮，呈现性别相关内分泌反应。
3.2 青春期雄性和雌性小鼠的慢性社会挫败应激：通过10天CSDS、体重、CORT和成年性腺激素分析，雄性和雌性体重从PD28至PD62增加；应激雄性在PD32和PD38体重低于对照，成年PD62无显著组差，女性无显著应激相关体重差异。CORT在PD32（CSDS第5天早晨社会挫败后40 min）应激组高于对照，PD38和PD62无显著组差；PD62雌性CORT高于雄性。成年PD62孕酮女性高于男性，无显著组效应或性别×组交互；睾酮显示性别和组主效应，CSDS暴露动物总体较低，但无性别×组交互，且各性别内对比未达显著；雌二醇参数分析显示应激动物较低，但非参数分析不支持，女性性别内对比未通过Holm校正，应视为探索性。结论：CSDS引起急性HPA轴激活，雄性体重反应短暂，成年性腺激素改变选择性且较弱。
3.3 青春期重复社会挫败应激中的行为动态与适应谱：通过D1和D10家庭笼前后记录及PCA，重复社会应激改变活动性、身体接触和个体间距离，并呈性别依赖性轨迹。活动性在Pre到Post均下降；ΔBasal活动性在雄性增加，女性无显著变化，产生性别差异。身体接触在D1雄性增加，女性无显著变化；D10女性下降，雄性无显著变化；ΔBasal身体接触两性均增加，女性增加更大；ΔGlobal身体接触两性均为正，无显著性别差异。个体间距离在D1雄性下降、女性增加，产生性别差异；D10雄性下降接近显著、女性无显著变化，性别差异不再显著；纵向两性距离下降，女性ΔBasal和ΔGlobal下降更大。PreD1基线PCA中PC1解释50.6%、PC2解释25.2%，合计75.9%，女性主要表现为更高身体接触。共享时点PCA中PC1解释58.3%，代表较高身体接触与较低个体间距离，PC2解释33.4%，主要代表活动性，合计91.7%；PC1呈性别×时间交互，D1雄性和女性沿相反方向移动，基线PC1位置从PreD1至PreD10在两性均变化且女性更大；PC2亦呈性别×时间交互；bootstrap支持结构稳定。结论：两性并未表现为统一应激表型，而是遵循不同适应轨迹。
3.4 青少年应激后成年结局及探索性发育连续性
3.4.1 成年行为结局：通过DWT、OF、SI、EPM和SPT评估，成年行为主要受性别影响。DWT中管内时间有性别主效应，应激雌性长于应激雄性；OF中雌性移动距离少于雄性；SI比值雌性更高。EPM开臂时间显示应激主效应，应激动物低于非应激动物，且非应激与应激雄性差异显著。SPT无显著效应。结论：成年行为效应较微妙，以性别差异为主，EPM提示焦虑相关效应选择性持续。
3.4.2 青少年适应指数与成年结局探索性关联：通过性别校正线性模型和PCA轨迹分析，主要关联均未通过BH校正。名义水平上，D10身体接触下降与成年DWT管内时间增加相关；ΔBasal平均距离与成年SI比值正相关；Δ1身体接触与SI比值负相关。应激暴露且睾酮有效值动物中，睾酮与Δ1身体接触呈Spearman正相关，但性别校正线性模型不显著，应视为假设生成。基线PC1较高与成年SI比值和社会偏好较高相关，与蔗糖偏好较低相关；PreD10–PreD1沿共享PC1接触/接近轨迹较大位移与较低成年SI比值相关。总体未发现青少年行为指标与成年结局之间稳健预测关系。
讨论部分总结：该研究主要发现是青春期重复社会挫败应激重组熟悉社会群体内自发社会行为，且该重组呈性别依赖性轨迹，而非产生统一应激表型。应激暴露引起明确CORT反应，证实HPA轴参与，但该反应具时间限制：接近持续应激的采样点CORT升高，PD38和PD62与对照相当。无成年基底CORT组差不能排除HPA轴组织或反应性持久改变，因未评估肾上腺形态或新成年应激反应。体重方面，应激雄性在CSDS期间及结束后一天体重较低，成年无持续差异；女性无显著差异。HPG轴结果受性别、发育阶段、应激时长和采样窗口塑造：青春期ASDS选择性降低应激雌性孕酮；成年CSDS后睾酮总体降低但无性别×组交互；雌二醇仅参数分析显示较弱组效应，需谨慎。行为上，PreD1雄雌已占据部分不同基线行为空间，主要由女性更高身体接触驱动；PCA被用作描述性维度总结，而非分类应对表型。急性社会挫败后，雄性活动性下降并转向更高社会接近/接触，女性虽基线亲和行为较高，但短暂远离接触/接近极；重复CSDS后，两性出现社会接近重组，女性纵向基础亲和行为增加更明显。成年结局较微妙且由性别主导，连续性分析未发现稳健预测，仅名义关联提示青少年适应与成年表型存在概率性联系。与既往显示持久成年改变的研究相比，本文成年表型有限，研究者认为应激后返回熟悉笼伴可能提供社会缓冲，但该保护不完全，因EPM仍显示持续性焦虑相关效应。局限性包括未直接测量神经、免疫或分子机制；PCA为描述性且限于重复记录维度；非应激对照无时间匹配纵向家庭笼记录；发育连续性分析为探索性；SPT无单独习惯化或基线偏好阶段，24 h单笼测试可能受新异性和群居改变影响；两性均喷洒混合成年雄性尿液，无尿液单独对照；但视频监测未发现损伤、刻板行为或骑跨，未提前终止会话或剔除动物。
研究结论翻译：总之，青少年期慢性社会应激可诱发急性HPA轴激活，但其最具信息量的特征是应激经历本身期间社会行为的性别依赖性重组。雄性和雌性占据部分不同的基础行为空间，并在重复暴露中遵循不同适应轨迹，而成年结局未显示广泛的持续性内分泌或行为表型。该模式提示，青少年社会应激应被理解为时间依赖性和多变量过程，其中性别塑造即时适应以及后期行为后果的选择性持续。
