《Journal of the Egyptian National Cancer Institute》：Association of XRCC6 -61 C?>?G and XRCC7 6721G?>?T polymorphisms with susceptibility to pediatric acute lymphoblastic leukemia
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急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia, ALL）是儿童中最常见的恶性肿瘤。XRCC6和XRCC7基因在非同源末端连接（nonhomologous end-joining, NHEJ）修复过程中发挥关键作用，并可能影响AL
急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia, ALL）是儿童中最常见的恶性肿瘤。XRCC6和XRCC7基因在非同源末端连接（nonhomologous end-joining, NHEJ）修复过程中发挥关键作用，并可能影响ALL易感性。本研究旨在评估儿童ALL中XRCC6 -61 C>G（rs2267437）和XRCC7 6721G>T（rs7003908）多态性。
材料与方法：研究人员从患者全血样本的棕黄层（buffy coat）中提取基因组DNA。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP）方法，使用特异性限制性内切酶（BanI和Pvu II）对XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T多态性进行基因分型。
结果：本研究发现XRCC6 -61 C>G的CC基因型（P = 0.006）和CG基因型（P = 0.01）与ALL患者显著相关。值得注意的是，虽然CC基因型在Bonferroni校正后仍保持显著关联（P < 0.01），但CG基因型关联为名义性（P在0.01和0.05之间），应谨慎解读。XRCC7 6721G>T的GT基因型（P = 0.02）和TT基因型（P = 0.05）分别与男性和女性ALL显著相关。在B细胞亚型ALL患者中，XRCC6 -61 C>G的CC基因型（P = 0.04）、GC基因型（P = 0.05）和C等位基因（P = 0.05）显示出显著关联。XRCC7 6721G>T的GT基因型（P = 0.003）和TT基因型（P = 0.05）在B细胞ALL中也显著相关。在具有良好细胞遗传学异常的ALL患者中，观察到XRCC6 -61 C>G的CC基因型（P = 0.04）和C等位基因（P = 0.03）显著关联。
结论：总之，研究人员的发现提示XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T多态性可能与儿童ALL易感性相关，并具有潜在的谱系特异性和细胞遗传学背景依赖性效应。然而，鉴于亚组分析的探索性质以及统计学局限性，这些结果应谨慎解读。需要大规模、多中心研究并进行功能验证，以确认这些关联并阐明其潜在机制。
本研究针对儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia, ALL；儿童最常见的血液恶性肿瘤）的遗传易感性展开。癌症已成为全球第二大死因，ALL约占儿科恶性肿瘤的四分之一，美国每年新发约3000至4000例，儿童占三分之二；2006至2014年间伊朗15岁以下儿童ALL年平均发病率约为2.25/10万，且南部和东部省份存在高发聚集区。ALL的发病涉及影响淋巴干细胞的多种遗传改变，导致未成熟淋巴细胞快速增殖。约75%的儿童ALL具有复发性染色体异常，如t(12;21)、t(1;19)、t(9;22)和11q23的MLL重排等。DNA双链断裂（double-strand break, DSB）的错误修复被认为是白血病发生的重要起源事件之一。非同源末端连接（nonhomologous end-joining, NHEJ）是DSB的主要修复途径，XRCC6（Ku70）和XRCC7（Ku80）编码蛋白形成异二聚体，高亲和力结合DSB并招募下游修复因子，对维持基因组稳定至关重要。然而，既往XRCC家族多态性研究多集中于XRCC1和成人实体瘤，在儿童ALL中针对XRCC6和XRCC7的研究很少，且尚未有研究按B/T细胞谱系或细胞遗传学风险分组进行分析。因此，研究人员开展了一项病例对照研究，旨在评估XRCC6 -61 C>G（rs2267437）和XRCC7 6721G>T（rs7003908）多态性对儿童ALL易感性的影响。研究结果表明，两个多态性均与儿童ALL存在关联，且可能具有谱系特异性和细胞遗传学背景依赖性效应，提示其可作为儿童ALL易感性的候选生物标志物，并为理解NHEJ修复缺陷在白血病发生中的作用提供新线索。
研究人员从伊朗法尔斯省（Fars province）一家血液肿瘤转诊中心招募了2023至2025年间连续就诊的100例ALL患儿，并纳入100名年龄、性别匹配的健康对照。主要技术方法为PCR-RFLP：从全血棕黄层（buffy coat）中提取基因组DNA，针对XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T位点进行PCR扩增后，分别用BanI和Pvu II限制性内切酶酶切，再经2%琼脂糖凝胶电泳区分基因型。质量控制包括10%样本随机重复基因分型（一致率100%）和阴性对照。统计分析采用直接基因计数、卡方检验、Fisher精确检验和Armitage检验比较等位基因/基因型频率，计算比值比（odds ratio, OR）和95%置信区间（confidence interval, CI）；对照组进行Hardy-Weinberg平衡检验，并对免疫表型和细胞遗传学亚组分析应用Bonferroni校正。样本量根据次要等位基因频率0.25、把握度80%、预期OR=2.0计算，每组至少85人，实际每组100人。
在结果部分，主要发现如下：
**XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T多态性与ALL的关联**
总体关联分析显示，XRCC6 -61 C>G的CC基因型（P=0.006；OR=2.1，95%CI：1.1–3.9）和CG基因型（P=0.01；OR=0.61，95%CI：0.3–1.2）在ALL患者中的分布与对照组有显著差异；Bonferroni校正后CC基因型仍显著，CG基因型为名义性关联，应谨慎解读。XRCC7 6721G>T的GT基因型（P=0.02；OR=0.38，95%CI：0.14–1.02）和TT基因型（P=0.05；OR=6.2，95%CI：0.83–2.7）分别与男性和女性ALL显著相关，其中女性TT基因型为名义性关联。显性模型分析显示XRCC6 -61 C>G的CC基因型（CC vs. CG+GG）显著增加ALL风险（P=0.004，OR=2.3，95%CI：1.3–4.1），隐性模型未达显著。
**按T/B细胞谱系分层的XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T多态性评估**
在B细胞ALL患者中，XRCC6 -61 C>G的CC基因型（P=0.04；OR=2.6，95%CI：0.86–8.1）、GC基因型（P=0.05；OR=0.35，95%CI：0.1–1.2）以及C等位基因（P=0.05；OR=2.08，95%CI：0.87–4.7）均显示显著关联，但GC基因型和C等位基因的关联为名义性。XRCC7 6721G>T的GT基因型（P=0.003；OR=4.2，95%CI：1.3–13.2）和TT基因型（P=0.05；OR=0.32，95%CI：0.08–1.2）在B细胞ALL中也显著相关，其中TT为名义性关联。这些结果提示两个多态性可能主要与B细胞谱系ALL的遗传易感性相关。
**按细胞遗传学异常状态分组的XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T多态性分析**
在具有良好细胞遗传学异常的ALL患者中，XRCC6 -61 C>G的CC基因型（P=0.04；OR=0.3，95%CI：0.81–11.5）和C等位基因（P=0.03；OR=2.5，95%CI：0.87–4.7）显著富集；C等位基因的关联在Bonferroni校正后为名义性。该结果表明XRCC6 -61 C>G多态性的效应可能依赖于ALL的细胞遗传学背景。
讨论部分，研究人员将本结果与既往研究进行了比较。与Aref et al.在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia, AML）中报道的XRCC6 CG/GG基因型保护效应相反，本研究中XRCC6 CC/CG基因型与ALL风险增加相关；差异可能源于癌症类型、细胞起源（淋巴系与髓系）以及种族和遗传背景的不同。Akgun et al.在甲状腺乳头状癌中的发现以及Jia et al.在多种恶性肿瘤中的结果也显示该多态性具有组织和疾病特异性。机制方面，XRCC6 -61 C>G位于启动子区，可能影响转录因子Sp1的结合从而改变XRCC6转录活性；XRCC7 6721G>T位于内含子8，可能影响mRNA剪接效率或稳定性。两者均可能减少Ku70/Ku80异二聚体形成，损害DSB识别，延迟NHEJ修复，导致染色体易位积累。与既往在实体瘤中的研究不同，本研究首次提示XRCC7 6721G>T效应可能存在性别依赖性，并支持B细胞谱系特异性关联。但Pei et al.、Chang et al.和Farokhian et al.的研究未观察到一致的主效应，提示种族、环境暴露及基因-环境交互可能修饰这些关联。局限性包括样本仅来自伊朗法尔斯省、部分亚组样本量小导致置信区间宽、未纳入详细环境暴露数据等。研究结论为：XRCC6 -61 C>G和XRCC7 6721G>T多态性可能与儿童ALL易感性相关，具有潜在谱系特异性和细胞遗传学背景依赖性效应；鉴于亚组分析的探索性质和统计学局限性，这些结果应谨慎解读，需大规模、多中心研究并结合功能验证以确认关联并阐明潜在机制。
