溴代脱硫生物素(Br-DTB)标签通过同位素MS1信号实现化学修饰的无偏鉴定与共价标记位点发现

《RSC Chemical Biology》:Bromo-Desthiobiotin (BrDTB) Tag for Unbiased Profiling and Identification of Chemical ModificationsOpen Access

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年10月17日 来源:RSC Chemical Biology 3.9

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   打开图形查看器 利用半胱氨酸的固有反应性,isoTOP-ABPP(基于活性的蛋白质谱分析)已成为一种强大

  

利用半胱氨酸的固有反应性,isoTOP-ABPP(基于活性的蛋白质谱分析)已成为一种强大的化学蛋白质组学平台,用于半胱氨酸定量、配体及化学修饰发现。在此,我们报告了新的溴代脱硫生物素叠氮化物(Br-DTB)标签,用于共价标记,从而实现化学修饰的无偏鉴定。除了从MS2谱中进行肽段鉴定外,Br的同位素MS1特征信号提供了额外的验证层次,用于确认标记位点并排除假阳性分配。为支持这一分析,我们开发了一款公开可用的内部软件,可自动识别该同位素特征信号。Br-DTB标签的准确性已通过体外合成肽段以及活细胞中L-叠氮同型丙氨酸(AHA)标记得到进一步验证。我们进一步阐明了木鳖子素(PL)在E3连接酶KEAP1上的共价标记位点,展示了其用于发现新型共价标记位点的实用性。总之,Br-DTB标签适用于化学蛋白质组学工作流程,为共价标记发现和功能性蛋白质组谱分析提供了稳健的平台。

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