溴代脱硫生物素（Br-DTB）标签通过同位素MS1信号实现化学修饰的无偏鉴定与共价标记位点发现

《RSC Chemical Biology》：Bromo-Desthiobiotin (BrDTB) Tag for Unbiased Profiling and Identification of Chemical ModificationsOpen Access

【字体：大中小】 时间：2026年10月17日 来源：RSC Chemical Biology 3.9

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利用半胱氨酸的固有反应性，isoTOP-ABPP（基于活性的蛋白质谱分析）已成为一种强大的化学蛋白质组学平台，用于半胱氨酸定量、配体及化学修饰发现。在此，我们报告了新的溴代脱硫生物素叠氮化物（Br-DTB）标签，用于共价标记，从而实现化学修饰的无偏鉴定。除了从MS2谱中进行肽段鉴定外，Br的同位素MS1特征信号提供了额外的验证层次，用于确认标记位点并排除假阳性分配。为支持这一分析，我们开发了一款公开可用的内部软件，可自动识别该同位素特征信号。Br-DTB标签的准确性已通过体外合成肽段以及活细胞中L-叠氮同型丙氨酸（AHA）标记得到进一步验证。我们进一步阐明了木鳖子素（PL）在E3连接酶KEAP1上的共价标记位点，展示了其用于发现新型共价标记位点的实用性。总之，Br-DTB标签适用于化学蛋白质组学工作流程，为共价标记发现和功能性蛋白质组谱分析提供了稳健的平台。