《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》：Discovery and quanti?cation of quality control chemical markers for Fomes Officinalis Kechuan oral liquid by UPLC–MS/MS combined with chemometrics
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•采用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术在福康口服液（FOKOL）中鉴定出62种化合物。•其中20种成分通过与对照品比对得以确认。•采用UPLC-TQS-MS/MS方法对福康口服液中的20种成分进行了定量分析。•通过层级聚类分析（HCA）和偏最小二乘判别分析（PLS-
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采用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术在福康口服液（FOKOL）中鉴定出62种化合物。
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其中20种成分通过与对照品比对得以确认。
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采用UPLC-TQS-MS/MS方法对福康口服液中的20种成分进行了定量分析。
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通过层级聚类分析（HCA）和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）筛选出六种核心质量标志物。
引言
中医药的质量是中医药产业发展的根本生命线，其核心在于中医药化学成分的复杂性和多样性。中医药疗效的物质基础通常表现为多种成分协同作用的结果，其多靶点整合调节的生物学机制与临床疗效和用药安全性密切相关。质量标志物（Q-Marker）作为中医药质量评价体系中的核心概念，是指存在于中药材及其制剂中，或在制备过程中产生的化学物质[1], [2]。质量标志物能够表征中医药的功能属性，并与其药理学特征密切相关。质量标志物的确定基于中医药体系的生物特性、制剂工艺特点和方剂配伍理论[3], [4]，系统地整合了物质基础研究基础与质量控制标志物之间的内在联系，从而构建了中医药质量控制研究的新模式。
福康口服液（Fomes Officinalis Kechuan Oral Liquid, FOKOL）是中国新疆维吾尔自治区特有的一种民族药物，由九味药材组成，分别为：茯苓（Fomes officinalis (Vill. ex Fr.) Ames）、桃金娘（Prunus domestica）、芦根（Rhizoma Phragmitis）、甘草（Glycyrrhizae radix et rhizoma, Ephedrae Herba）、白术（Aucklandiae Radix）、茴香（Pimpinella anisum L.）、香附（Cyperi Rhizoma）和陈皮（Amomi Fructus Rotundus）。临床上，福康口服液主要用于治疗哮喘以及急慢性支气管炎，具有镇咳、平喘、祛痰的治疗效果。尽管福康口服液具有广泛的药理活性和广泛的临床应用，但其物质基础仍缺乏充分的表征。这一知识空白不仅阻碍了全面的质量控制评估，也限制了对潜在作用机制的进一步探索。因此，亟需系统表征福康口服液的化学成分并加强其质量控制措施。值得注意的是，福康口服液尚未被收录于《中国药典》。目前现有的质量标准仅监测甘草酸含量。然而，对于这种多味复方制剂而言，仅依赖单一质量标志物无法全面反映其整体质量，因为其治疗效果源于多成分间的协同作用。因此，为确保福康口服液的安全性、有效性和质量一致性，必须鉴定出能够准确代表其药效物质基础的特征化学成分，从而建立可靠的质量控制体系。
液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）是中医药质量标志物研究中不可或缺的解析技术。得益于高灵敏度和高质量精度，LC-MS能够对中医药复方中的微量和痕量化学成分进行快速表征和结构鉴定[5]。通过数据库比对和碎片化模式分析，LC-MS能够对质量标志物进行系统描绘，从而建立全面的物质基础光谱数据库。质谱的多反应监测（MRM）模式具有优异的线性、重现性和选择性[6]，能够实现对多批次样品中目标质量标志物的同时准确定量。目前，超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）已被广泛认可为一种稳健可靠的分析工具，在中医药化学成分定性定量分析中得到广泛应用[7]。
本研究开发并验证了一种在MRM模式下运行的UPLC-TQS-MS/MS方法，用于福康口服液中20种含量较高或具有显著生物活性的成分的定量分析。这些分析物包括：3种核苷类（尿苷、腺苷和鸟苷）、1种糠醛类化合物（5-羟甲基糠醛）、7种黄酮类（槲皮素3-葡萄糖醛酸苷、阿魏酸-4'-O-β-D-葡萄糖苷、新甘草苷、甘草苷、异甘草苷、甘草苷-芹糖苷和异甘草苷-芹糖苷）、6种咖啡酰奎宁酸衍生物（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸）、1种有机酸（原儿茶酸）、1种苯丙素类（毛蕊花糖苷）和1种三萜皂苷类（甘草酸）（图1）。此外，本研究应用了多元统计模型，包括聚类分析、主成分分析（PCA）和偏最小二乘判别分析（PLS-DA），对19批次福康口服液进行分析。这些模型用于识别和分类质谱获得的化学成分多维指纹数据，从而筛选出可能导致批间质量差异的潜在差异性标志物和稳定性指标。
章节摘要
化学试剂与样品
福康口服液由国药集团新疆制药有限公司（中国乌鲁木齐）提供；尿苷、腺苷和鸟苷购自北京金达威股份有限公司；5-羟甲基糠醛、槲皮素3-葡萄糖醛酸苷、阿魏酸-4'-O-β-D-葡萄糖苷、新绿原酸、隐绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、原儿茶酸和毛蕊花糖苷购自国家药品食品监督管理局药品审评中心（中国北京）；新甘草苷、甘草苷
福康口服液主要成分的鉴定
为全面表征福康口服液的化学成分谱，本研究建立了基于UHPLC-Orbitrap-MS/MS的集成分析流程。数据采集采用全扫描模式辅以数据依赖型MS/MS碎裂，可同时记录所有可检测成分的高精度母离子质量（MS1）和具有结构信息的碎片离子谱（MS2）。采用Compound Discoverer 3.3软件对原始光谱数据进行处理
结论
本研究利用UPLC-MS/MS技术系统表征了福康口服液的化学成分谱。通过与对照品比对，明确鉴定了20种代表性成分，并成功建立了一种具有高特异性、灵敏度、准确度和可靠性的多成分定量分析方法。该方法首次应用于福康口服液的质量与稳定性评价，显著提高了分析效率。
利益冲突声明
作者声明不存在可能影响本文所报告工作的已知财务利益冲突或个人关系。
致谢
本研究受新疆维吾尔自治区工业和信息化领域重点产业人才支持计划（XJRC-2025-GX-ZDCY-05）、新疆维吾尔自治区重大科技专项（2022A03019-4）、天山英才·医学卫生健康领域高层次人才培育项目（TSYC202301A084）和中国医学科学院医学与健康创新医学计划（2026-I2M-SXZX11-02）资助。
赵学佳 | 邱晓丹 | 孙圣南 | 李卓荣 | 刘轩林 | 单广志
