《Journal of Ethnopharmacology》：ShenqiYichang decoction enhances colorectal cancer immune efficacy via IDO1 mediated reduction of Treg infiltration
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1. 网络药理学和生物信息学分析表明，吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO1）可能是SQYCD在微卫星稳定性（MSS）结直肠癌（CRC）中的潜在靶点。
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1. 网络药理学和生物信息学分析表明，吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO1）可能是SQYCD在微卫星稳定性（MSS）结直肠癌（CRC）中的潜在靶点。
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2. SQYCD通过抑制IDO1的酶活性和IDO1-PI3K相互作用来减少Treg细胞的浸润。
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3. SQYCD增强了ICIs治疗MSS CRC的效果，并重塑了肿瘤免疫微环境。
引言
结直肠癌（CRC）对全球疾病负担贡献巨大，具有双高特征：其发病率在实体瘤中始终位居第三位，死亡率则是癌症相关死亡的第二大原因（Chatila等人，2022年）。根据微卫星状态，CRC可分为两种亚型，其中微卫星不稳定（MSI）肿瘤占约15%，而大多数（85%）为微卫星稳定（MSS）肿瘤（Li等人，2023年）。免疫疗法在CRC治疗中取得了进展，免疫检查点抑制剂（ICIs）对MSI CRC患者显示出有益效果，显著提高了5年总生存率（OS）（André等人，2020年）。然而，MSS CRC患者对ICIs单药治疗的临床反应较差。为了增强ICIs在MSS CRC患者中的抗肿瘤效果，将其与其他治疗方式结合是一个活跃的研究领域。临床实践中已进行了尝试，例如使用抗血管生成剂或酪氨酸激酶抑制剂（Kuo等人，2024年；Rose和Kim，2024年）。这些方案取得了一定效果，但仍未满足临床需求。因此，需要进一步研究更有效的联合策略。
通常，MSS CRC表现出免疫抑制性的肿瘤微环境（TME），其特征是大量免疫抑制细胞（尤其是Treg细胞）的浸润，这些细胞会分泌抑制性细胞因子如IL-10和TGF-β（Saito等人，2016年）。Treg细胞引起的免疫逃逸是MSS CRC对ICIs产生耐药性的原因之一（Li等人，2023年）。目前已有几项临床研究旨在通过减少TME中Treg特异性膜蛋白介导的免疫抑制来提高ICIs的效果（Qin等人，2024年；Wang等人，2020年），但这种方法可能会破坏TME平衡并触发其他抑制细胞的补偿性反应（Mota Reyes等人，2022年）。阻断肿瘤细胞代谢是另一种抑制Treg细胞浸润的方法，且不会导致TME失衡（Liu等人，2025年；Tang等人，2020年）。因此，通过靶向肿瘤细胞来抑制Treg细胞的激活和募集是更有前景的策略。
吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO1）是一种含亚铁血红素的双加氧酶，在微卫星稳定肿瘤中过度表达（Zaravinos等人，2019年），是Treg细胞介导的免疫逃逸的关键治疗靶点。在IDO1-/-小鼠中，Treg细胞的募集受到抑制，生存期延长（Solvay等人，2023年）。诺吉参苷通过降低IDO1表达来抑制Treg细胞分化（Li等人，2022年）。从机制上看，IDO1可通过多种途径促进Treg细胞逃逸：首先，IDO1介导的色氨酸代谢导致犬尿氨酸积累，激活Akt的磷酸化（p-AKT）（Bishnupuri等人，2019年），而p-AKT可促进Treg细胞浸润（Ren等人，2023年）；其次，apo-IDO1（无血红素的IDO1形式）与PI3K的相互作用激活NF-κB和TGF-β通路（Iacono等人，2020年；Panfili等人，2023年）。已知TGF-β可促进Treg细胞浸润（Wang等人，2023年）。因此，通过抑制IDO1来提高MSS CRC对ICIs的敏感性是一种可行的策略。
中医在治疗CRC方面拥有丰富的经验，其优点在于能够靶向多种通路，减少副作用，并在提高疗效的同时降低毒性。参芪杞冲汤（SQYCD）是一种用于治疗CRC的传统中药方剂，由人参（Ren shen）、黄芪（Huang qi）、黄芩（Ku shen）、夏枯草（Yu zhi zi）、三叶草（Yi yi ren）、猕猴桃（Teng li gen）等药材组成（Cao等人，2026年；Wang等人，2025年）。该方剂具有健脾、祛湿、活血化瘀、解毒的作用，并且安全性良好。SQYCD适用于术后、中期和晚期CRC。研究表明，SQYCD不仅可以减少Treg细胞的浸润，还可以降低IL-2和p-AKT的水平（Luo等人，2024年），但其相关机制仍需进一步探索。我们通过网络药理学和生物信息学分析发现IDO1是SQYCD减少Treg细胞浸润的潜在靶点，因此推测SQYCD可通过抑制肿瘤来源的IDO1来减少Treg细胞浸润，从而提高MSS CRC对ICIs的反应。
本研究使用携带CT26肿瘤的小鼠来验证SQYCD减少Treg细胞浸润的效果。此外，还利用体外 CT26-Treg共培养系统研究了SQYCD调节Treg细胞从而缓解MSS CRC的机制。这些发现为SQYCD与ICIs的联合应用提供了坚实的科学基础。
部分摘要
SQYCD方剂的制备
SQYCD由以下药材组成：人参220克、黄芪330克、黄芩132克、枸杞220克、夏枯草330克。所有药材用10体积的蒸馏水浸泡30分钟，煮沸60分钟后过滤。残留物再在8体积的蒸馏水中加热60分钟并过滤。最终将两次提取物合并浓缩成浓度为4.56克/毫升的粗药。
含药物的大鼠血清制备
三十只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠
SQYCD可能调节免疫细胞
我们使用携带CT26肿瘤的小鼠建立了MSS CRC模型（图1A）。小鼠每日口服SQYCD，剂量分别为11.4克/千克（L）、22.8克/千克（M）和45.6克/千克（H）。第21天将小鼠处死，立即进行肿瘤解剖，测量肿瘤重量和体积。结果显示各组之间没有显著差异，肿瘤抑制效应不明显（图1B-D）。我们通过监测体重变化来评估SQYCD的安全性
讨论
SQYCD是一种用于治疗CRC的传统中药方剂。我们发现SQYCD可以减少MSS CRC肿瘤微环境中的Treg细胞浸润，并增强ICIs的抗肿瘤效果。通过进一步的网络药理学和生物信息学研究，发现IDO1可能是MSS CRC的治疗靶点。SQYCD不仅通过下调酶活性，还通过其他机制减少肿瘤微环境中的Treg细胞水平
结论
总之，网络药理学和生物信息学分析表明IDO1是SQYCD在MSS CRC中的潜在靶点。体内和体外研究均证明，SQYCD通过抑制IDO1/Kyn/p-AKT和IDO1-PI3K相互作用来减少Treg细胞浸润，从而增强ICIs的效果，为SQYCD与ICIs的联合应用提供了坚实的科学基础。
作者贡献声明
周洋：研究工作。薛荣涛：软件开发。李凌昌：方法学设计、数据分析。方玉曦：写作、审稿与编辑、监督。杨云鹤：写作、审稿与编辑、初稿撰写、数据可视化、软件应用、方法学设计、数据管理、概念构思。张健：初稿撰写、监督、项目管理、资金争取。张东健：审稿与编辑、项目管理。高萌：数据分析。其他成员：
本研究遵循ARRIVE（动物研究：体内实验报告）指南进行。该研究获得了江苏省中医药研究院（南京中医药大学中西医结合医院附属医院）动物伦理与福利委员会的批准（批准编号：AEWC-20250315-514）。
作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。
资金支持
本研究得到了江苏省消化系统中医临床创新中心（项目编号：2021.6）、国家自然科学基金（项目编号：82004288）和江苏省卫生委员会医学科学研究重点项目（项目编号：ZD2022020）以及无锡太湖人才计划（202101）的支持。
利益冲突声明
作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。
著者：杨云鹤 | 李凌昌 | 方玉曦 | 周洋 | 薛荣涛 | 高萌 | 周兰梅 | 张健 | 张东健
