UCMSCs来源的sTNFR1通过NF-κB/SOCS3轴调控巨噬细胞极化促进缺血性脑卒中后神经功能恢复

《Inflammation》：sTNFR1 from UCMSCs promotes post-MCAO recovery by driving macrophage reparative polarization via NF-κB/SOCS3 signaling

　　缺血后免疫微环境在神经炎症与组织修复之间起着关键的平衡作用，使巨噬细胞极化成为脑梗死治疗的关键靶点。脐带间充质基质细胞（UCMSCs）主要通过旁分泌信号调节巨噬细胞极化，但其关键介质和潜在机制尚未完全阐明。我们采用基于蛋白质组阵列的方法对共培养上清液进行筛选，鉴定出UCMSCs分泌的调节巨噬细胞极化的可溶性因子。通过腺病毒转导构建了稳定过表达可溶性肿瘤坏死因子受体1（sTNFR1）的UCMSCs（oe-sTNFR1）。利用免疫印迹、RT-qPCR、免疫荧光和流式细胞术在体外研究了sTNFR1调节巨噬细胞极化的机制。通过向大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠模型脑内注射oe-sTNFR1 UCMSCs评估其治疗功效，采用组织学染色（尼氏染色和氯化三苯基四氮唑）、行为学测试和磁共振成像评估结局。为避免基因改造的风险，开发了靶向TNF-α的小抗体（TNF-α Nb），并与野生型UCMSCs联合测试。蛋白质组分析鉴定出sTNFR1是UCMSCs分泌的重编程巨噬细胞极化的关键介质。oe-sTNFR1 UCMSCs以旁分泌依赖的方式增强巨噬细胞趋化作用并促进修复性极化。机制上，UCMSCs来源的sTNFR1抑制NF-κB通路，这不仅减弱了促炎性极化，还解除了SOCS3信号的抑制，从而促进修复表型。在MCAO大鼠中，脑内注射oe-sTNFR1 UCMSCs将缺血后脑微环境重塑为抗炎和促修复状态，通过减少梗死体积和改善功能结局促进神经功能恢复。此外，与单独使用UCMSCs相比，联合使用TNF-α Nb和野生型UCMSCs增强了修复性髓系表型并改善了神经功能结局。本研究确立了UCMSCs来源的sTNFR1作为通过sTNFR1/NF-κB/SOCS3轴调节巨噬细胞极化的关键旁分泌介质，有助于缺血性脑卒中后的功能恢复。结合TNF-α Nb与UCMSCs的策略提供了一种新颖且具有临床前景的免疫治疗方法。