《Molecular Genetics and Metabolism Reports》：Longitudinal analysis of clinical and biochemical outcomes during seven years of galactose supplementation in a patient with SLC35A2-CDG
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背景：SLC35A2-CDG是一种罕见的X连锁先天性糖基化障碍（congenital disorder of glycosylation, CDG），由UDP-半乳糖向高尔基体转运受损引起，导致多系统受累并伴有突出的神经系统表现。尽管口服半乳糖补
摘要专业翻译
背景：SLC35A2-CDG是一种罕见的X连锁先天性糖基化障碍（congenital disorder of glycosylation, CDG），由UDP-半乳糖向高尔基体转运受损引起，导致多系统受累并伴有突出的神经系统表现。尽管口服半乳糖补充治疗已被提出作为靶向疗法，但其长期疗效与安全性仍不明确。
方法：研究人员报告了一项针对一名接受口服D-半乳糖补充治疗超过七年的女性SLC35A2-CDG患者的纵向研究。临床结局采用奈梅亨儿科CDG评定量表（Nijmegen Pediatric CDG Rating Scale, NPCRS）进行评估，糖基化异常通过N-糖组学分析（N-glycomics profiling）进行监测。随后，将与临床严重程度相关的糖基化生物标志物回顾性地应用于评估另外8名对半乳糖治疗无反应或反应不确定的SLC35A2-CDG患者。
结果：该索引患者表现出显著的临床和生化改善，NPCRS评分从22分改善至12分。血浆N-糖谱分析显示，低半乳糖基化聚糖和正常形成的二唾液酸化聚糖均出现改善并趋于正常化。分级N-糖分析证实，亲和纯化的转铁蛋白（transferrin, Tf）及去除IgG、转铁蛋白和白蛋白的三重去除血浆组分（triple-depleted plasma fraction, TD）均呈现一致的改善。研究还发现糖基化标志物与疾病严重程度之间存在强相关性。相比之下，7名无反应患者未表现出明显的临床或生化反应，而1名患者表现出部分生化改善且临床病程稳定。
结论：本研究首次提供了长期证据，表明半乳糖补充治疗对SLC35A2-CDG患者有效，可观察到有意义的临床和生化改善。糖基化谱分析可作为监测治疗反应和指导个体化治疗的辅助工具。
论文解读文章
一、研究背景与目的
SLC35A2-CDG（OMIM #300896）是一种罕见的X连锁先天性糖基化障碍，既往被归类为CDG type IIm。该疾病由SLC35A2基因致病性变异引起，该基因编码负责将UDP-半乳糖转运至高尔基体的转运蛋白，这一过程对于N-连接和O-连接聚糖、糖胺聚糖及糖鞘脂的合成至关重要。该转运功能缺陷导致多系统受累，包括发育迟缓、癫痫、面部畸形、肝功能障碍和骨骼异常等临床表现。
目前，半乳糖补充治疗被认为是SLC35A2-CDG的潜在治疗策略，但并非所有患者均对该治疗产生反应，且长期治疗结局的数据仍不明确。既往关于半乳糖治疗的研究报告了不一致或缺乏反应的结果，导致对其长期临床获益存在不确定性。因此，开展长期纵向研究以明确半乳糖补充治疗的疗效、安全性及治疗反应预测因素具有重要的临床意义。
二、研究设计与技术方法
本研究为一项纵向观察性研究，经费城儿童医院机构审查委员会批准，并取得患者监护人的书面知情同意。研究对象包括1名索引患者（患者1）及8名额外的SLC35A2-CDG女性患者（患者2–9）。其中，患者3和7此前由Ng BG等在Hum. Mutat.中报告为CDG0449和CDG0059，患者8和9由Witters P等在Genet. Med.中报告为患者7和患者6，患者2、4、5、6的数据此前未发表。
研究采用的主要关键技术方法包括：临床严重程度采用奈梅亨进行性CDG评定量表（NPCRS）进行评分，该量表评估三个部分：第一部分为当前功能，第二部分为系统特异性受累，第三部分为当前临床评估，总分按严重程度分为轻度（0–14分）、中度（15–25分）和重度（>26分）。糖基化分析采用液相色谱-电喷雾电离-飞行时间质谱（LC-ESI-TOF/MS）进行半定量N-聚糖分析，同时进行碳水化合物缺乏转铁蛋白检测（CDT）和血浆N-糖检测作为常规临床检验。为进一步评估不同血浆糖蛋白的糖基化变化，研究人员对亲和纯化的免疫球蛋白（IgG）、转铁蛋白（Tf）以及去除IgG、Tf和白蛋白的三重去除血浆组分（TD）分别进行了N-糖谱分析。此外，研究人员开发了血浆低半乳糖基化指数（under-galactosylation index），计算方法为两种低半乳糖基化聚糖各自与正常范围上限比值的加权和，正常指数≤3。统计分析采用IBM-SPSS Statistics 29.0版本，使用Pearson相关系数评估NPCRS评分与聚糖生物标志物之间的关联。
三、研究结果
3.1 七年半乳糖治疗后的临床效果
索引患者（患者1）于1岁10个月龄开始口服半乳糖补充治疗，逐步滴定至治疗剂量1.5 g/kg/天（最大50 g/天），并持续治疗至今。治疗6周后即观察到临床改善。患者现年9岁，就读三年级，大部分时间融入常规课堂。总NPCRS评分从22分改善至12分，其中第一部分（当前功能）评分从12分降至5分，主要改善体现在运动能力方面（从3分降至0分），沟通和自理能力也有额外获益。第二部分评分从3分降至1分，第三部分评分从7分降至6分，改善幅度较小。在整个治疗期间，血半乳糖-1-磷酸中位数为0.84 mg/dL（正常<1.0 mg/dL），尿半乳糖醇中位数为53 mmol/mol肌酐（正常<36 mmol/mol肌酐，治疗范围<98 mmol/mol肌酐），均低于治疗范围上限。未观察到临床不良事件。AST水平在治疗开始后13周即趋于正常化。
3.2 治疗后糖基化变化
经七年半乳糖补充治疗，索引患者血浆N-糖谱分析显示正常糖基化的二唾液酸化聚糖显著增加，截短聚糖M-gal从2.74%降至1.21%，A-gal从0.33%降至0.22%。分级N-糖分析显示各组分糖蛋白糖基化总体改善，其中Tf组分中M-gal从3.39%降至1.57%，较治疗前基线降低约53.7%；A-gal从0.60%降至0.38%；二唾液酸化聚糖恢复正常并增加至77.23%。TD组分中M-gal从3.13%降至1.77%，改善43.5%；A-gal从0.18%降至0.12%。IgG组分的A-gal、M-gal和二唾液酸化聚糖在治疗前后均处于正常范围。
3.3 糖基化与临床严重程度的相关性
Pearson相关分析显示糖基化异常与NPCRS测量的疾病严重程度之间存在强关联。最强的正相关见于Tf组分M-gal丰度与第一部分评分之间（r=0.887, p=2.35E-05），其次为总血浆低半乳糖基化指数与总分之间（r=0.886, p=2.49E-05）、总血浆A-gal丰度与总分之间（r=0.878, p=3.69E-05）、总血浆低半乳糖基化指数与第一部分评分之间（r=0.862, p=7.47E-05）、TD组分低半乳糖基化指数与第一部分评分之间（r=0.856, p=1.86E-04）以及总血浆M-gal丰度与第一部分评分之间（r=0.852, p=1.10E-04）。相反，Tf组分二唾液酸化聚糖丰度与第一部分和第二部分评分呈负相关（r=?0.787, p=8.35E-04；r=?0.779, p=1.03E-03）。第三部分评分未发现显著相关性。
3.4 额外SLC35A2-CDG患者的比较分析
研究人员使用相同的一组聚糖生物标志物对8名额外患者进行回顾性评估。治疗前NPCRS总分范围为15–40分，开始半乳糖治疗年龄为5个月至20岁，治疗持续时间为6–40个月。7名患者的NPCRS总分随时间增加，提示该疾病自然病程呈稳定且缓慢进展。患者4表现出中度改善，总分从26分降至22分，第一部分评分从14分降至11分，第二部分评分从4分降至2分。生化方面，患者4血浆N-糖谱显示A-gal从0.65%降至0.10%，M-gal和二唾液酸化聚糖保持正常范围。其余7名患者在糖组学谱或NPCRS评分方面均未表现出有意义的改善，其中4名患者在初始6–9个月试验后停止了半乳糖治疗。
四、讨论与结论
本研究提供了长期口服半乳糖治疗可导致SLC35A2-CDG女性患者显著临床和生化改善的证据。索引患者在七年持续治疗中表现出N-糖谱的进行性正常化，呈剂量依赖性，并伴随NPCRS评分的明确功能获益，主要体现在第一部分评分。糖基化异常与临床严重程度之间的强相关性表明，特定聚糖可作为具有预测价值的定量生物标志物，其中Tf组分M-gal和血浆A-gal丰度与临床严重程度评分关联最为密切，可作为疾病严重程度的敏感指标和治疗监测的可靠参数。
通过对8名初始被归类为无反应者的患者进行回顾性评估，研究人员识别出从部分生化改善到完全无反应的反应谱。患者4尽管临床评估中第三部分评分变化极小而被视为无反应者，但表现出明确的生化反应性，A-gal在40个月治疗后快速降低并恢复正常。该病例提示生化改善可能先于或比常规临床评估更敏感地检测治疗反应。值得注意的是，NPCRS第一部分评分（功能评估）是优于第三部分评分的临床生物标志物。在索引患者和患者4中，第三部分评分均未明显改善。
研究还发现，5名部分或无反应者（患者2、3、4、6、7）在治疗前即出现早发性严重癫痫。尽管癫痫曾被提出可作为治疗反应的潜在预测因素，但本研究发现不支持将其作为可靠的决定因素。患者4尽管存在严重癫痫仍表现出部分反应性，而患者8无癫痫却无反应。这些观察表明，癫痫病史单独不足以预测治疗结局，不应作为半乳糖治疗的排除标准。然而，在不可逆神经损伤发生前尽早开始半乳糖治疗可能对获得显著临床获益至关重要。
在索引患者和患者4中，糖基化生物标志物能够检测早期生化反应，有时先于可测量的临床变化。研究人员开发的血浆低半乳糖基化指数综合了两种聚糖的变化，与NPCRS评分表现出最佳相关性，可作为治疗反应的早期支持性指标，帮助指导治疗决策。鉴于受影响患者中无反应者比例较高，这一点尤为重要。
本研究结论为：该工作扩展了当前对半乳糖在SLC35A2-CDG中治疗潜力的理解。虽然证据支持在特定患者中可获得有意义的改善，但也强调了个体化评估和长期观察的重要性。糖基化谱分析可作为评估治疗反应的辅助工具，并可能指导未来研究中治疗策略的优化和临床试验候选者的预筛选。鉴于患者间反应的变异性，这些发现强调了需要将生化和临床结局结合解读的必要性。
