Rab5a和RIN2是促进单核细胞李斯特菌细胞间扩散的关键宿主内吞调控因子

《The Journal of Infectious Diseases》：Rab5a and RIN2 Promote L. monocytogenes Cell-to-Cell Spreading in JEG-3 Cells

　　

摘要

背景

兼性胞内病原体单核细胞李斯特菌在宿主细胞间扩散以感染整个器官。这种细胞间转移是由细菌因子协调驱动的，它们在"发送"细胞中形成富含肌动蛋白的指状李斯特菌足突起结构，并在"接收"细胞中通过内吞作用摄取这些大型结构。此前的研究表明，摄取这些大型结构的过程利用了Caveolin介导和Flotillin介导的内吞作用。然而，早期内吞调控因子如何参与单核细胞李斯特菌的细胞间扩散仍有待探索。

方法

使用免疫荧光显微镜分析JEG-3细胞在单核细胞李斯特菌感染过程中Rab5a/RIN2的定位。随后，通过使用野生型和突变体构建体的转染以及siRNA介导的敲低方法，考察这些蛋白质的功能。

结果

我们发现，Rab5a和RIN2选择性富集于单核细胞李斯特菌的内陷处，但未富集于李斯特菌足突起处。功能性细胞间扩散实验结合功能缺失和功能获得方法显示，在接收细胞中减少或抑制Rab5a会显著降低细菌扩散，而组成性活性Rab5a的表达则增强了细胞间扩散。类似地，RIN2定位至Rab5a阳性的内陷处，且是高效细胞间扩散所必需的，RIN2敲低导致细菌转移显著减少。

结论

我们的数据确定Rab5a和RIN2为促进单核细胞李斯特菌扩散的关键宿主内吞调控因子。