大麻二酚（CBD）减轻青春期应激诱导的成年小鼠社会与物体识别记忆缺陷及mPFC/vHip中PV+中间神经元和PNNs损害

《Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry》：Cannabidiol attenuates behavioral impairments and deficits in parvalbumin interneurons and their perineuronal nets induced by adolescent stress in adult mice

　　

重复给予CBD（cannabidiol，大麻二酚）减轻了青春期应激诱导的成年小鼠社会记忆和物体识别记忆缺陷。青春期应激降低了mPFC（medial prefrontal cortex，内侧前额叶皮质）和vHip（ventral hippocampus，腹侧海马）中PV⁺（parvalbumin阳性）、PNN⁺（perineuronal nets阳性）和PV⁺/PNN⁺细胞，CBD减轻了这些改变。在vHip中观察到青春期应激后SST⁺（somatostatin阳性）细胞减少较不明显，且CBD治疗具有影响。

论文解读

研究背景与问题

青春期是神经系统经历突触重塑、激素波动以及皮质和边缘环路重组的关键窗口，因此对应激高度易感。临床和前临床证据提示，青春期应激会增加长期情绪和认知功能障碍风险，并可能通过破坏仍在成熟的抑制性网络实现，尤其影响内侧前额叶皮质（medial prefrontal cortex，mPFC）和腹侧海马（ventral hippocampus，vHip）等应激敏感脑区。mPFC和vHip依赖兴奋-抑制平衡，慢性应激可破坏局部中间神经元网络和可塑性机制。parvalbumin（PV，小清蛋白）表达中间神经元是快放电抑制控制的关键调节者，其保护性perineuronal nets（PNNs，神经元周围网）在青春期仍在发育，因此对青春期应激敏感；既往啮齿类模型显示，青春期应激可降低mPFC和vHip中PV中间神经元及PNN密度。somatostatin（SST，生长抑素）表达中间神经元也参与应激反应，并调节树突整合和突触可塑性，但其在青春期应激相关改变中的作用了解较少。CBD（cannabidiol，大麻二酚）是Cannabis sativa的非精神活性成分，前临床研究显示其可增强PV中间神经元活动、促进PNN完整性，并逆转前额叶和海马中应激或病理诱导的缺陷。因此，本研究检测青春期应激对主要中间神经元群体及行为的影响，并评估CBD治疗能否逆转成年期行为和细胞改变；研究评估焦虑相关行为、社会与认知结局，并分析mPFC和vHip中PV、SST及PNN表达。其意义在于刻画与青春期应激长期行为改变相关的细胞改变，并评估CBD的保护作用。

研究人员开展了什么研究，得出什么结论，有什么意义

研究人员使用雄性C57BL/6J小鼠，在PND 31–40进行10天足底电击应激，PND 41–50给予CBD（30 mg/kg，i.p.）或vehicle，成年后进行行为测试和免疫荧光分析。结论为：青春期应激导致成年期社会记忆和物体识别记忆缺陷，并降低mPFC和vHip中PV⁺、PNN⁺、PV⁺/PNN⁺细胞以及vHip中SST⁺细胞；CBD治疗减轻了行为和细胞缺陷。该研究强调青春期是应激易感时期，并提示CBD是减轻长期青春期应激相关功能障碍的有前景干预策略。

关键技术方法（不超过250字）

样本为雄性C57BL/6J小鼠（postnatal day，PND 21），来源于圣保罗大学Ribeir?o Preto校区中央动物设施繁殖群体，随机分为四组。关键方法包括：PND 31–40每日足底电击应激；PND 41–50腹腔注射CBD（30 mg/kg）或vehicle；PND 65起依次进行高架十字迷宫（EPM）、明暗箱（LDB）、社交互动（SI）、社会辨别（SD）和新物体识别（NOR）测试；随后灌注取脑，对mPFC和vHip进行PV/PNN与SST免疫荧光，共聚焦采集z-stack并用FIJI定量PV⁺、PNN⁺、PV⁺/PNN⁺和SST⁺细胞；统计采用两因素或三因素ANOVA及Tukey post hoc检验。行为n=8/组，免疫荧光n=6–8/组。

研究结果

3.1 青春期应激和CBD治疗后焦虑相关行为未改变
通过EPM和LDB评估，开放臂进入百分比、开放臂停留时间、封闭臂进入数、明箱进入数和明箱停留时间均无显著组间差异；提示青春期应激未在成年期诱导可检测的焦虑相关行为改变，CBD治疗也未产生显著效应。

3.2 青春期应激损害社会记忆而不影响社交性，CBD治疗减轻这些缺陷
SI测试中所有组均更多探索社会刺激，SI指数无改变；SD测试中，vehicle处理的应激组不能区分新异与熟悉同种同类，SD指数显示治疗效应（F_1,28=7.66，p=0.01）和应激趋势（F_1,28=3.28，p=0.08），CBD减轻了应激诱导的SD改变。

3.3 CBD治疗减轻物体识别记忆缺陷
NOR获得期两组相同物体探索时间无差异；保留期中，vehicle处理的应激组对新异和熟悉物体交互时间相似，discrimination index显示显著stress × treatment交互（F_1,28=9.15，p=0.005），vehicle处理的应激组低于vehicle处理的对照，CBD治疗减轻该缺陷。

3.4 CBD治疗减轻青春期应激诱导的成年小鼠mPFC和vHip中PV⁺细胞及其相关PNNs减少
免疫荧光显示，mPFC中PV⁺（p=0.02）、PNN⁺（p<0.001）和PV⁺/PNN⁺（p=0.0001）均有stress × treatment交互，应激降低这些细胞，CBD减轻减少；vHip中PV⁺（p=0.01）、PNN⁺（p<0.001）和PV⁺/PNN⁺（p=0.01）同样有交互，CBD减轻减少。

3.5 青春期应激降低成年小鼠vHip中SST⁺细胞
mPFC中无显著差异；vHip中两因素ANOVA显示应激（F_1,27=6.65，p=0.02）和治疗（F_1,27=5.88，p=0.02）效应，无交互，表明应激降低SST⁺细胞，CBD治疗倾向于增加SST⁺细胞。

讨论部分总结

讨论指出，青春期应激导致成年期认知损害，表现为社会记忆和物体识别缺陷，并伴随mPFC和vHip中PV⁺及PNN包裹细胞显著减少；vHip中SST⁺细胞也减少，但较PV⁺细胞改变轻，mPFC中SST⁺细胞无变化。焦虑样行为未改变，讨论认为青春期应激相关焦虑结局变异较大，且不排除电路水平功能障碍。SI保留而SD和物体识别受损，提示应激优先破坏需要编码和提取信息的高级功能，而非基本社会动机；SD依赖vHip至mPFC投射，物体识别涉及更广泛网络，二者均汇聚于前额叶-海马环路。PV中间神经元和PNNs维持兴奋-抑制平衡并支持认知加工，其破坏可能促成记忆损害。SST亚型差异可能与其主要调节远端树突输入且较少依赖PNN保护有关。CBD在应激后立即给药10天减轻认知损害，并减轻PV⁺、PNN⁺和PV⁺/PNN⁺细胞减少，vHip中SST⁺细胞有增加趋势。讨论提到CBD可调节内源性大麻素信号、抗炎并影响PV中间神经元功能；既往证据显示CBD可增加mPFC中PV中间神经元内参与anandamide合成的N-酰基磷脂酰乙醇胺磷脂酶D，并在MK-801诱导精神分裂症小鼠模型中经vHip的5-HT_1A和CB₂受体依赖机制逆转PV和PNN缺陷。局限性为仅使用雄性小鼠；既往同一应激方案显示雄性改变更明显，雌性变异更大且相对耐受，因此不能假定雌性对CBD反应相同。临床方面，CBD获FDA批准用于Lennox-Gastaut综合征、Dravet综合征和结节性硬化症相关癫痫，也在焦虑和精神分裂症辅助治疗中研究，但针对青春期应激相关损害的临床试验仍缺乏。

研究结论翻译

总之，青春期应激导致长期认知缺陷，以及mPFC和vHip中PV⁺/PNN⁺细胞损伤，以及vHip中SST⁺细胞损伤。此外，在10天青春期应激期后立即给予CBD治疗减轻了成年期观察到的行为和细胞缺陷。这些发现强调青春期是易感时期，并指出CBD是减轻长期青春期应激相关功能障碍的有前景干预。