脯氨酰羟化是寨卡病毒NS1蛋白的关键翻译后修饰

《npj Viruses》：Prolyl hydroxylation is required for maturation and secretion of Zika virus non-structural protein 1

摘要

蚊子传播的正黄病毒（如寨卡病毒和登革热病毒）具有高流行潜力，可导致从无症状感染到严重并发症的多种临床结局。正黄病毒非结构蛋白1（NS1）可结合于细胞膜上或从细胞中分泌，在病毒复制、免疫逃避和致病性中发挥重要作用。为了描述寨卡病毒NS1的相互作用组，我们用表达FLAG标记NS1的重组寨卡病毒感染Huh7细胞和神经祖细胞，并通过定量质谱鉴定相互作用蛋白。在两种细胞类型中，均鉴定出多种脯氨酰羟化酶、糖基化酶、内质网相关降解蛋白及免疫相关蛋白为NS1的相互作用蛋白。质谱数据表明NS1含有潜在羟脯氨酸残基，提示脯氨酰羟化酶参与NS1的翻译后修饰。与此一致，化学抑制脯氨酰羟化酶会损害NS1的细胞内转运和质膜定位，并降低寨卡病毒RNA水平和滴度。第281位脯氨酸残基的突变会损害NS1分泌，但病毒复制未受影响。此外，将第267位的脯氨酸替换后，NS1表达出现严重失调，且仅需一代传代即可回复至野生型序列，表明该突变导致严重的复制缺陷。我们的研究结果表明，脯氨酰羟化是寨卡病毒NS1的一种关键翻译后修饰。