人T细胞介导的SARS-CoV-2细胞毒性试验在血液与肺泡区室中的概念验证研究

《Scientific Reports》：Development of a human respiratory tract effector cell-mediated antiviral assay using blood and airway immune cells from individuals previously hospitalised with COVID-19

　　

摘要

血清抗体介导的中和试验与SARS-CoV-2的保护性免疫相关，但细胞介导的体外细胞毒性试验尚缺乏。关于人体呼吸道病毒特异性免疫反应的数据仍然有限。本研究招募了15名曾因严重COVID-19肺炎住院的健康参与者。通过流式细胞术对外周血单核细胞（PBMC）、支气管肺泡灌洗液（BAL）和鼻灌洗液（NL）细胞进行表型鉴定。使用15肽池或重组蛋白对细胞进行SARS-CoV-2 S1受体结合域和核衣壳抗原刺激。通过荧光素酶试验评估抗原刺激的效应细胞对SARS-CoV-2 Delta假病毒的区室特异性效应细胞介导的细胞毒性。通过Luminex测量细胞因子表达。在不同区室中观察到不同的免疫特征。BAL中巨噬细胞和树突状细胞占优势，NL中B细胞占优势，PBMC中T细胞和自然杀伤细胞占优势。BAL细胞表达显著更高的IL-1β，而PBMC表现出更高的TNF-α、IL-2和IL-6表达。肽抗原和蛋白抗原之间的反应没有差异。抗原刺激的PBMC、BAL和NL细胞的假病毒细胞毒性显著高于未刺激对照组（p?<?0.05）。这项概念验证研究在血液和肺泡区室建立了功能性人T细胞介导的SARS-CoV-2细胞毒性试验，为研究未来大流行相关的抗病毒黏膜免疫提供了平台。